一、染料木黄酮(genistein)对肿瘤的防治作用及其机制（论文文献综述）
周丽媛[1]（2021）在《母代运动和饮食干预对子代成年期糖脂代谢的影响及机制研究》文中认为第一部分母代运动和饮食干预显着改善生命早期不良营养编程的子代成年期糖脂代谢异常[研究目的]目前全球糖尿病患病率迅猛增长,但其发病机制尚不完全明确。我国糖尿病等代谢异常的医疗资源多分布在疾病已形成期或出现并发症后,对于疾病的早期识别和早期干预迫在眉睫。近年来越来越多的研究显示生命早期不良营养环境将增加成年期患糖尿病、肥胖等慢性疾病的风险。本研究拟通过动物模型探究母代运动和饮食干预是否可改善甚至逆转生命早期营养过剩导致的子代成年期代谢异常。[研究方法]我们构建了 2个独立的小鼠队列来验证“母代运动和饮食干预可有效改善子代成年期糖脂代谢”的科学假说:1.母代运动干预小鼠模型:C57BL/6J雌性小鼠按体重随机分为三组:正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食运动组。运动干预方式为自主跑轮。其中运动干预时间为孕前3周和孕期,饮食干预时间为孕前3周、孕期和哺乳期。2.母代染料木黄酮饮食干预小鼠模型:C57BL/6J雌性小鼠随机分为三组:正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食添加染料木黄酮组（0.6g/kg体重）,干预时间为孕前3周、孕期和哺乳期。两个小鼠模型中雌性小鼠均与同年龄正常饮食自由活动状态的C57BL/6J雄鼠合笼交配,子鼠断乳后均给予正常饮食至24周龄。监测母鼠和子鼠的体重、出生体重、脂肪含量、摄食量、运动量并进行葡萄糖耐量试验,母鼠哺乳期结束后和24周龄子鼠处死取外周血,分离获取血清,进行胰岛素和血脂谱检测,分析母代运动和饮食干预对子代成年期代谢的影响。[研究结果]1.孕前3周、孕期和哺乳期高脂饮食使母鼠血糖、空腹血清胰岛素水平、血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平显着高于正常饮食组。而母代运动干预对自身糖脂代谢改善有限,仅有降低HOMA-IR指数的趋势。然而,母代高脂饮食导致子鼠出现追赶生长,随着年龄增长有逐渐发生肥胖的趋势,同时糖耐量试验曲线下面积显着增大,至24周龄时皮下和内脏脂肪组织显着增多,出现胰岛素抵抗和高胆固醇、高甘油三酯血症。而母代运动干预可防止子代发生肥胖,同时降低血糖、减少糖耐量试验曲线下面积,改善胰岛素抵抗和血脂紊乱,降低脂肪组织含量。2.在母代染料木黄酮饮食干预小鼠模型中,我们同样发现母鼠围产期9周高脂饮食使自身和子鼠都发生糖代谢异常和血脂紊乱,而染料木黄酮干预有降低母鼠血清空腹胰岛素水平的趋势,同时可显着降低其孕期空腹血糖水平。对于子鼠,母代染料木黄酮饮食干预可阻止其出生后追赶生长,同时显着降低糖耐量试验曲线下面积,减少24周龄时皮下和内脏脂肪含量,改善胰岛素抵抗和血脂紊乱。[研究结论]母代孕前期3周和孕期的自主跑轮运动干预可显着改善生命早期高脂饮食导致的子代易感肥胖和糖脂代谢紊乱;母代孕前期3周、孕期和哺乳期的生物活性成分染料木黄酮饮食干预同样降低了成年子代的体脂含量,改善了生命早期高脂饮食导致的子代糖代谢异常、胰岛素敏感性降低及血脂谱紊乱。因此,对生命早期不良环境进行运动和饮食干预可有效改善甚至逆转不良“代谢记忆”,及时预防和阻断成年期糖脂代谢异常的发生,使从根本上在生命早期水平阻断未来糖脂代谢异常的发生发展成为可能。第二部分肠道菌群在介导母代干预调控子代成年期糖脂代谢中的作用[研究目的]肠道菌群在代谢健康中发挥着重要的作用。近年来越来越多的研究提示肠道菌群可能在生命早期不良发育环境增加成年期代谢异常风险中扮演了重要的角色,可能是破译“代谢记忆”的关键机制之一。鉴于运动和染料木黄酮均可调控肠道菌群,我们拟探究肠道菌群是否在介导母代运动和饮食干预中发挥了重要作用。[研究方法]在第一部分建立的母代运动干预小鼠模型和母代染料木黄酮饮食干预动物模型基础上,获取哺乳期结束后母鼠以及成年24周龄子鼠的盲肠内容物。肠道微生物16s rRNA扩增子测序采用Illumina Hiseq 2500 PE250。应用生物信息学对测序获得的reads进行OTU分析、物种注释、物种差异分析及样本多样性分析,并将差异物种与代谢通路相关联,使用Spearman相关性分析将差异菌属与糖脂代谢指标进行分析。[研究结果]1.正常饮食组、高脂饮食组和高脂饮食运动组三组间母鼠菌群β多样性分析显示显着分离。同时运动干预使母鼠肠道中Alloprevotella、Barnesiella、Odoribacter和Saccharibacteriagenerancertaesedis菌属丰度显着增加。对于成年子鼠,β多样性分析显示三组子代菌群显着分离。母鼠围产期高脂饮食使子代在属水平显着富集Lachnospiraceaincertae sedis和Anaeroplasma菌,而母代运动显着增加成年子代Helicobacter、Odoribacter和 Clostridium/mXIVb丰度。Spearman 相关性分析显示母代高脂饮食使子鼠显着富集的Anaeroplasma菌与糖耐量试验糖负荷后血糖以及曲线下面积、空腹胰岛素、HOMA-IR指数和总胆固醇水平呈显着正相关,同时Lachnospiraceaincertaesedis菌与血糖和游离脂肪酸水平也呈现正相关。与此相反,母代运动干预增加的Helicobacter和Odoribacter菌均与成年子鼠的血糖、胰岛素和血脂呈现显着负相关。2.在染料木黄酮饮食干预小鼠队列中,β多样性分析显示三组母鼠菌群显着分离。在属水平,高脂饮食显着富集Mucispirillum菌,染料木黄酮饮食干预后该菌丰度明显恢复。而 Barnesiella、Clostridium XIVa、Clostridium IV、Eubacterium和Bifidobacterium在高脂饮食后丰度显着低于正常组,染料木黄酮饮食干预可恢复Allobaculum、Barnesiella、Clostridium XIVa和Eubacterium的丰度。对成年子鼠,β多样性分析显示母代高脂饮食和染料木黄酮饮食干预后成年子代肠道菌群显着分离。在属水平,母代高脂饮食使子代肠道中双歧杆菌属丰度显着降低。而Erysipelotrichaceae incertae sedis菌属在母代摄入染料木黄酮的子代肠道中显着富集。Spearman相关性分析显示双歧杆菌属以及母代染料木黄酮饮食显着富集的子代Erysipelotrichaceaencertaesedis菌与成年子代的血清空腹胰岛素、血脂以及白色脂肪含量呈现显着负相关。[研究结论]1.母代高脂饮食和运动干预使母体和成年子鼠的肠道菌群显着分离,组成和结构发生明显改变,改变的菌群与糖脂代谢指标呈现显着相关性。其中肠道有害菌Lachnospiraceaincertae sedis的减少和产短链脂肪酸菌的显着富集,可能是介导母代运动跨代调控代谢的关键因素。2.母代染料木黄酮饮食摄入也调节了自身和子代的肠道菌群,改变的菌群与改善的代谢指标之间具有明确的相关性。其中肠道产短链脂肪酸（主要是丁酸）菌以及Erysipelotrichaceae incertae sedis的显着富集、有害菌属 Mucispirillum的减少,可能在母代染料木黄酮饮食干预改善子代代谢健康中发挥了重要作用。此外,双歧杆菌菌属与母体和子代的代谢改善均相关。本研究原创性地探究了肠道菌群在介导运动和染料木黄酮摄入跨代调控代谢中的作用,从肠道菌群视角为生命早期预防和阻止代谢异常的发生和发展提供了一些理论证据和可能的干预靶点,为我国代谢性疾病的防治窗口前移奠定了基础。第三部分表观遗传修饰可能是解释母代运动和饮食干预调控成年期子代代谢的重要机制[研究目的]表观遗传学是介导基因和环境互作的重要机制,在代谢调控中发挥重要作用。随着高通量测序技术的快速发展,近期证据显示miRNAs可能是介导生命早期不良环境编程代谢的关键机制之一。但目前尚无研究探究母代运动和饮食干预对子代成年期表观遗传学修饰的影响。本研究旨在探究母代运动和饮食干预对子代成年期肝脏代谢的编程效应及miRNAs是否在其中发挥了重要的调控作用。[研究方法]在第一部分建立的母代运动和染料木黄酮饮食干预的跨代动物模型基础上,我们进一步获取了 24周龄成年子鼠的肝脏组织,进行RNA提取和转录组学、miRNAs高通量测序,并对测序数据进行生物信息学分析,最后采用qRT-PCR方法对测序结果进行验证。[研究结果]1.与正常饮食组相比,母代高脂饮食导致成年子代肝脏195个基因显着上调,158个显着下调;而与高脂饮食组子代相比,母代运动显着上调285个基因,下调324个基因。其中母代高脂饮食显着上调而运动干预显着下调的基因共有122个,KEGG通路富集分析显示主要富集在与糖代谢和氨基酸代谢密切相关的信号通路上;而母代高脂饮食显着下调而运动干预显着上调的基因共有89个,主要富集在PPAR信号通路、不饱和脂肪酸合成和脂肪酸代谢信号通路上。2.与正常对照组相比,母代高脂饮食的子代肝脏共有20个差异的miRNAs;而与高脂饮食组子代相比,母代运动干预使13个miRNAs下调,7个miRNAs显着上调。两组比较中有3个共同差异的miRNAs,分别为miR-204-5p、miR-10b-5p、miR-139-3p,均在高脂饮食组子代显着下调,而母代运动干预上调其表达。其靶基因参与了表观遗传调控以及SREBF调控的胆固醇合成。3.与正常饮食组相比,母代高脂饮食导致的成年子代肝脏差异基因显着富集在固醇类激素生物合成、初级胆汁酸生物合成、TGFβ信号通路以及糖尿病并发症相关信号通路上。与高脂饮食组相比,母代染料木黄酮摄入显着调控了 49个差异基因,其中32个上调,17个下调,这些基因显着富集在与糖代谢和氨基酸代谢密切相关的信号通路上。其中共有10个母代染料木黄酮干预逆转的基因,这些基因主要富集在与免疫调控和炎症反应等密切相关的信号通路上。4.与正常对照组相比,母代高脂饮食的子代肝脏共有20个差异的miRNAs。而与高脂饮食组子代相比,母代染料木黄酮饮食干预使27个miRNAs水平改变,包括17个显着下调,10个上调。两组比较中共有3个共同差异的miRNAs,分别为miR-12206-5p、miR-200a-5p、miR-21a-3p,均在母代高脂饮食子代中显着下调,而母代染料木黄酮饮食干预可显着上调其表达,其靶基因参与了糖脂和氨基酸代谢调控等相关信号通路。[研究结论]1.母代运动干预在分子水平也显着调控了子代成年期肝脏代谢,逆转母鼠高脂饮食调控的基因,这些基因富集在糖脂代谢相关重要信号通路上。同时显着逆转成年期肝脏组织3个miRNAs表达水平,其靶基因进一步参与调控胆固醇合成代谢以及表观遗传学修饰,可能在介导运动跨代代谢调控中发挥了重要作用。2.母代染料木黄酮饮食干预不仅在表型方面,在分子水平也显着调控子代成年期肝脏组织代谢,逆转高脂饮食改变的基因,这些基因显着富集在免疫调控相关信号通路上。表观遗传调控机制研究显示母代染料木黄酮饮食干预可上调其高脂饮食下调的子代成年肝脏组织 miRNAs 水平,包括 miR-12206-5p、miR-200a-5p、miR-21a-3p,这些miRNAs参与了糖脂代谢调控和炎症反应,可能是介导母代染料木黄酮饮食干预编程子代成年期代谢的关键分子之一。总之,本研究开创性地探究了表观遗传调控在介导母代运动和染料木黄酮饮食干预编程子代成年期代谢中的作用,为不良“代谢记忆”的逆转增添了新的内容,为生命早期糖脂代谢异常的预警和防治提供理论依据。
陈志青[2]（2020）在《GPR30在染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡和周期影响中的作用及其机制》文中认为[目 的]探究人甲状腺鳞癌SW579细胞中雌激素相关受体表达情况,以及阻断其表达雌激素受体前后,染料木黄酮对SW579细胞增殖、细胞凋亡和周期的影响及其机制,为明确染料木黄酮作用于人甲状腺癌SW579细胞可能的影响机制提供实验依据。[方 法]将人甲状腺癌细胞SW579细胞分空白对照组,染料木黄酮处理组（10、20、40、80、160、200、320μmol/L,G15未处理组）和雌激素相关受体阻断组（G15预处理合并染料木黄酮处理）。1.运用实时荧光定量聚合酶链反应（Real Time Quantitate PCR）检测人甲状腺癌细胞SW579中雌激素核受体ERα、ERβ和雌激素膜受体GPR30的表达情况及染料木黄酮对其的影响;2.运用MTT法确定GPR30的特异性阻断剂G15作用人甲状腺癌SW579的有效作用浓度及时间;3.运用MTT法检测特异性阻断GPR30前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖影响;4.运用Annexin V/FITC流式细胞技术检测特异性阻断GPR30前后染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞周期和凋亡的影响;5.运用转录组测序方法检测不同染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞作用后筛选差异性表达基因和信号通路及验证;6.统计学方法:数据采用SPSS 21.0软件进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。[结果]1.PCR结果显示SW579细胞表达ERβ和GPR30受体,不表达ERα。且当染料木黄酮浓度≥40μmol/L作用24h及浓度≥80μmol/L作用48h,SW579细胞中ERβ基因表达显着增强（P<0.05）;染料木黄酮浓度≥40μmol/L作用24和48h,SW579细胞中GPR30基因表达显着增强（P<0.05）。2.由 MTT 法可知 G15 在 SW579 细胞中的 IC50 为 15.17μmol/L,5μmol/L 的G15作用SW579细胞2小时,对其增殖无显着影响,确定G15处理SW579细胞的时间为2小时,浓度为5μmol/L。3.染料木黄酮浓度≥40μmol/L作用SW579细胞24和48h,可显着促进增殖,而G15特异性阻断GPR30后,且浓度≥80μmol/L时,染料木黄酮对SW579细胞的促增殖作用显着减弱（P<0.05）。当染料木黄酮浓度至≥200μmol/L作用48h时,无论GPR30是否被阻断,SW579细胞的增殖都显着被抑制,而G15特异性阻断GPR30后的抑制作用更显着（P<0.05）。4.流式细胞技术检测细胞凋亡,结果显示,染料木黄酮作用于SW579细胞24和48h,对其凋亡无明显影响,而GPR30被阻断后,当染料木黄酮剂量≥80μmol/L,SW579细胞凋亡率显着增大,且随时间增加凋亡率显着增加。细胞周期结果显示,GPR30被阻断前,SW579细胞周期主要阻滞在S期,阻断后,染料木黄酮剂量≥80μmol/L时,SW579细胞周期被阻滞在G2/M期。5.转录组测序结果显示,染料木黄酮作用人甲状腺癌SW579细胞后,使与癌症通路相关的33个基因发生显着变化,其中21个基因上调,12个基因下调,随机筛选上调的CDKN1A、FOXO1、DAPK、FOS基因和下调的EGF、FTGS2基因进行实时荧光定量PCR验证,验证结果与转录组筛选结果一致。6.据转录组测序结果筛选,染料木黄酮160μmol/L作用SW579细胞48h后,在PI3K-Akt、Ras、MAPK、Hippo、Wnt通路中有多个基因发生明显上调,PI3K-Akt、AGE-RAGE、MAPK、FoxO通路中有多个基因发生明显下调;CDKN1A、FOXO1、FOS、PLCG2基因在多个通路中发生显着上调,EGF、PTGS2、CXCL8基因在多个通路中发生显着下调。[结 论]1.人甲状腺癌SW579细胞中不表达ERα,表达ERβ和GPR30受体,染料木黄酮可显着上调SW579细胞中ERβ和GPR30基因的表达。2.特异性阻断人甲状腺癌SW579细胞中GPR30,染料木黄酮剂量≥80μmol/L时,可显着促进SW579细胞凋亡,细胞周期被阻滞在G2/M期。3.染料木黄酮作用人甲状腺癌SW579细胞后,可使与癌症通路相关的33个基因发生显着变化,其中21个基因上调,12个基因下调。4.染料木黄酮对SW579细胞的促增殖作用可能与PI3K-Akt、Ras、MAPK、Hippo、Wnt、AGE-RAGE、FoxO 通路有关,CDKN1 A、FOXO1、FOS、PLCG2、EGF、PTGS2、CXCL8可能是其靶基因。
徐小净[3]（2019）在《荸荠皮和浒苔的化学成分及其抗肿瘤、抗菌活性研究》文中认为具有优良药用价值的可食用植物是一类重要的生物资源,在我国的应用历史悠久。对其化学成分和营养成分的研究对充分开发利用这些宝贵资源具有重要的意义。本文选取莎草科荸荠属植物荸荠（HHeleocharis dulcis（Burm.f.）Trin）皮和绿藻门石莼科植物浒苔（Enteromorpha prolifera）作为研究对象,采用多种分离手段从荸荠果皮和浒苔两种植物中分离得到了 28个化合物,通过现代波谱学手段（红外光谱、质谱、核磁共振等）结合它们的理化性质,鉴定了全部28个化合物的结构。其中从荸荠皮中分离得到了 20个化合物:β-谷甾醇（B1）、16-三十一酮（B2）、白桦酯酸（B3）、β-胡萝卜苷（B4）、pheno1,2,4-bis（1,1-dimethylethyl）-,1,1’,1"-phosphite（B5）、（3ββ）-Lup-20（29）-ene-3,30-diol（B6）、肉桂酸（B7）、桦木醇（B8）、阿魏酸（B9）、n-tetratriacont-20,23-dienoic acid（B10）、对香豆酸（B11）、山奈酚（B12）、槲皮素（B13）、绿原酸（B14）、17-33 ketones（B15）、咖啡酸（B16）、芦丁（B17）、香豆素（B18）、对羟基苯甲酸（B19）、正丁基-β-D-呋喃果糖苷（B20）。从浒苔中分离得到了 8个化合物:β-谷甾醇（H1）、α-生育酚（H2）、对羟基苯甲酸乙酯（H3）、2’-脱氧尿嘧啶核苷（H4）、腺嘌呤（H5）、棕榈酸（H6）、balansenateⅡ（H7）、反式植醇（H8）。其中 B2、B5、B6、B8、B10、B15、B20、H3、H4、H6、H7、H8为首次从这两种植物中分离得到。MTT法肿瘤细胞增殖实验结果表明化合物B15对MGC-803、SKOV3、T24细胞均显示出良好的抑制能力,其IC50值分别达到20.02、25.65、10.20 μM,抑制能力均强于阳性对照5-Fu。Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、Hoechst 33258荧光染色、AO/EB染色、线粒体跨膜电位ΔΨm检测、Western blot蛋白印记分析和ROS测定等一系列生化实验结果证明B15可以特异性诱导T24凋亡,提高细胞内ROS的水平,引起线粒体跨膜电位下降,并确定凋亡通路为线粒体途径。本文通过微量肉汤稀释法同时研究了部分化合物的抗菌能力,结果表明,受试化合物对大肠杆菌均有抑制作用,其MIC（μg/mL）值在32～128之间;B12、B16对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,其MIC（μg/mL）值分别为16、32;B14、B16、B19、H2、H4、H8对枯草芽孢杆菌抑制作用较强,其MIC（μg/mL）值分别为32、32、32、32、16、32;对绿脓杆菌抑制作用较强的有B3、B9、B12、B16、H2、H3,其MIC（μg/mL）值分别为 32、32、32、16、16、32。论文还研究了荸荠皮的营养成分,研究发现荸荠皮含有丰富的粗纤维、多种矿物元素以及多种氨基酸。论文对荸荠皮和浒苔的化学成分研究,丰富了可食用植物在天然药物研究中的范畴,减少了资源浪费与生态环境污染,研究结果为进一步开发利用可食用植物的药用价值与保健作用提供了一定的理论指导。
赵丹[4]（2019）在《染料木黄酮对SW579和TT细胞系增殖、侵袭和转移能力的影响》文中进行了进一步梳理[目 的]检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579和TT细胞系增殖,粘附,侵袭和迁移能力的影响,探索染料木黄酮对SW579和TT细胞侵袭转移影响的可能机制,为染料木黄酮能否应用于甲状腺癌的防治提供理论基础,为提高甲状腺癌的临床治疗效果寻找新的途径。[方 法]研究对象为人甲状腺癌细胞株SW579和TT细胞,实验分阳性对照组（用染料木黄酮处理正常甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori-3-1）,空白对照组和染料木黄酮实验组（10,20,40,80,160μmol/L）。1.SW579细胞,TT细胞和Nthy-ori-3-1细胞加入相应浓度的染料木黄酮,分别作用于细胞24h,48h,72h,96h后,运用MTT法检测染料木黄酮对三种细胞（Nthy-ori-3-1,SW579,TT细胞）增殖活性的影响;2.运用细胞基质粘附实验检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579和TT细胞粘附能力的影响;3.运用Transwell小室法检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579和TT细胞侵袭能力的影响;4.运用Transwell小室法和划痕实验检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579和TT细胞迁移能力的影响;5.运用实时荧光定量聚合酶链反应（Real Time Quantitate PCR）检测染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响;6.统计学方法:数据采用SPSS 21.0软件进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。[结 果]1.染料木黄酮可显着抑制Nthy-ori-3-1细胞增殖,却可显着促进SW579,TT细胞的增殖。在Nthy-ori-3-1细胞中,与对照组相比,染料木黄酮各剂量组均显着降低Nthy-ori-3-1细胞的存活率,呈剂量反应关系;在SW579细胞中,染料木黄酮高剂量组（80μmol/L和160μmol/L）的细胞数量明显多于对照组（P<0.05）;在TT细胞中,细胞存活率随着染料木黄酮的浓度增大而增大,染料木黄酮的中剂量组（40μmol/L）和高剂量组（80μmol/L和160μmol/L）的细胞数量高于对照组（P<0.05）。2.染料木黄酮对SW579,TT细胞的粘附能力起到抑制作用与对照组相比,160μmol/L的染料木黄酮预处理SW579和TT细胞24,48h可显着抑制SW579和TT细胞的粘附能力（P<0.05）。3.染料木黄酮对SW579,TT细胞的侵袭能力起到抑制作用与对照组相比,当染料木黄酮的浓度≧40μmol/L时,SW579细胞穿过Matrigel人工基质胶的数目均少于对照组,随着染料木黄酮浓度的增加,穿过基质胶的细胞数目逐渐减少,在本实验的剂量范围内染料木黄酮可降低SW579细胞侵袭能力（P<0.05）;而对照组的TT细胞则无法穿越基质胶进入到下室。4.染料木黄酮对SW579,TT细胞的迁移能力起到抑制作用在Transwell迁移实验中,与对照组相比,当染料木黄酮的浓度≧40μmol/L时,穿过Transwell小室聚碳酸脂滤膜的SW579细胞数目均少于对照组,随着染料木黄酮浓度的增加,穿膜细胞数目逐渐减少,在本实验的剂量范围内染料木黄酮可降低SW579细胞迁移能力（P<0.05）;而对照组的TT细胞则无法穿越Transwell小室的聚酯碳酸膜进入到下室。在划痕实验中,对照组SW579细胞划痕24h后,创伤空白区域基本愈合。而相同时间点,当染料木黄酮的浓度≧40μmol/L时,各剂量组向空白区域迁移的细胞数均少于对照组,划痕宽度均大于对照组。在相同条件下,TT细胞对照组和各剂量组的划痕宽度均无明显变化。5.染料木黄酮对MMP-2 mRNA的表达起到抑制作用40,80和160μmol/L的染料木黄酮均可下调SW579细胞MMP-2 mRNA的表达,三个剂量组MMP-2 mRNA的相对表达量均低于对照组（P<0.05）。MMP-9基因在SW579细胞中不表达。[结论]1.本研究中染料木黄酮高剂量组（80μmol/L和160μmol/L）能显着促进SW579,TT细胞增殖,而中剂量组（40μmol/L）,高剂量组（80,160μmol/L）的染料木黄酮可显着降低SW579细胞的粘附,侵袭和迁移能力。提示染料木黄酮对SW579,TT细胞的影响机制可能有部分不同于其它肿瘤细胞,还需进一步研究。2.在本研究染料木黄酮可能主要通过下调MMP-2的表达,抑制SW579细胞的粘附,侵袭和迁移能力,从而显着抑制SW579细胞的转移,是否还有其它机制参与,还需进一步研究。
逄志骏[5]（2019）在《槐角染料木黄酮对电离辐射损伤保护作用的研究》文中研究指明随着核科学和核工业的发展,核技术的广范应用,人们在生产、生活、医疗和科研活动中接触到辐射的机会越来越多。电离辐射（Ionizing radiation,IR,以下简称辐射）能导致骨髓和肠道损伤等,而对可能遭受辐照威胁人员或接受放射治疗的患者预先使用电离辐射损伤保护药物则可以明显降低后期的辐射损伤,提高治愈率。但辐射损伤目前尚缺乏确实有效的保护药物,研究和开发辐射损伤保护药物一直是放射医学领域广受关注的热点。染料木黄酮（Genistein）是一种植物雌激素类化合物,具有很强的抗氧化作用,能降低辐射诱导的自由基水平,也可以通过抑制细胞凋亡、调节细胞周期和基因表达、促进DNA损伤修复等机制发挥辐射保护作用,且具有良好的成药性。化学合成的Genistein制剂Bio-300已在美国食品药品监督管理局注册研发并已进入临床试验研究,而我国对于开发Genistein作为辐射损伤保护药物的研究相对滞后。前期,我单位从中草药槐角（Fructus sophorae）中提取槐属甙、再将槐属甙酸解成Genistein的制备工艺获得国家发明专利（ZL02123450.7）,从而得到纯度达到药用级的槐角染料木黄酮（Fructus sophorae genistein,FSGen）单体（纯度99%以上）,回收率为0.54%,每克成本小于1元,使染料木黄酮作为原料药应用成为可能。其对骨质疏松症的治疗获得国家药物临床研究批件,I期临床试验结果已证明该药物的安全性。但该工艺同时存在着醇提槐角甙增加脱脂和回收醇的步骤,以及氯仿回流脱脂增加成本并污染环境等技术缺陷。鉴于FSGen在辐射损伤保护中的重要作用和前期我实验室的研究基础,本课题拟在前期基础上改进从槐角中提取FSGen的工艺,优化步骤,提高环保标准,节约成本,并对FSGen的辐射损伤保护功能和机制进行探索。为完成上述研究目标,我们开展了以下科学工作:1.在先前提取工艺基础上,我们简化步骤,省略醇提、有机溶剂脱脂步骤,并进行3批提取实验收取FSGen粗品,通过高效液相色谱（HPLC）检测样品纯度,并通过红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、核磁共振（NMR）和质谱（MS）对提取样品进行结构鉴定;2.流式细胞术和Western blotting检测FSGen对辐射诱导小鼠骨髓单个核细胞（BMCs）凋亡的抑制作用,H&E染色、免疫组化染色、免疫荧光染色观察FSGen在体内水平对辐射导致的骨髓损伤的保护作用;3.CCK-8细胞活力检测实验、流式细胞术、Western blotting、单细胞凝胶电泳（SCGE）、细胞衰老检测、细胞活性氧自由基（ROS）检测和细胞免疫荧光染色实验观察FSGen对辐射导致的大鼠小肠上皮细胞（IEC-6）损伤的保护作用;H&E染色、免疫组化染色、免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验（ELISA）观察FSGen对辐射导致小鼠小肠组织损伤和炎症的保护作用;4.转录组学测序分析FSGen发挥保护作用的关键分子机制;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、RNA干涉实验（RNAi）、CCK-8细胞活力检测实验、Western blotting和免疫组化染色研究DNA损伤修复基因Rassf1a和Ercc1在FSGen辐射保护作用中的意义。通过上述研究工作,我们得出了以下结论:改进后的FSGen提取工艺得到了高纯度的原料药,提取样品的结构正确,为5,7,4’-三羟基异黄酮,简化步骤后的工艺利于节约成本,保护环境,适于大批量生产;低浓度FSGen能有效抑制辐射导致的BMCs凋亡,皮下注射FSGen能保护小鼠全身受照后骨髓结构的破坏、减少骨髓组织细胞凋亡,保护造血细胞;低浓度FSGen预处理能有效提高X射线照射后IEC-6细胞的活力,减少细胞凋亡,降低DNA损伤程度,降低衰老程度并减少细胞内的ROS,FSGen预先注射给药也能减少辐射造成的小鼠小肠组织结构破坏、减轻炎症程度、减少细胞凋亡程度并缓解氧化损伤程度,提高小鼠的生存率;FSGen对辐射损伤的保护主要通过DNA损伤修复途径进行;FSGen能通过上调Rassf1a和Ercc1基因的表达发挥DNA损伤修复的功能。本课题改良了FSGen提取的工艺,系统研究了FSGen在辐射导致骨髓和小肠损伤中的保护作用,并对FSGen的保护作用分子机制进行了初步探讨,为进一步开发FSGen成为辐射损伤保护药物奠定了基础,也为我国自主知识产权辐射损伤保护药物的发展积累了资料。
李晶[6]（2019）在《法氏囊五肽抑制结肠癌HCT116细胞增殖效应的机制及其与金雀异黄素联合应用的初步研究》文中指出大肠癌（colorectal cancer,CRC）是危害人类健康的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势,并位于全球常见恶性肿瘤的第3位。手术是目前大肠癌治疗的首选方法,但化学药物是治疗大肠癌的重要手段。而天然来源药物或者是基于天然产物合成的衍生物在肿瘤治疗中已取得显着的效果,且因其毒副作用低、靶点多而越来越成为临床抗肿瘤药物研究的热点。法氏囊五肽和金雀异黄素均是天然来源的化合物。法氏囊五肽BP5（Bursopentin,Cys-Lys-Arg-Val-Tyr）是从鸡法氏囊中分离到的一种新的多功能性活性五肽。据报道,BP5能参与调节多条与抗肿瘤活性相关的细胞信号通路。然而,目前尚无相关文献报道BP5对肿瘤细胞生长抑制作用的研究。金雀异黄素（Genistein,Gen）广泛分布于葛根、槐角、金雀花、山豆根等豆科植物中,是很多中草药的天然活性成分之一。研究表明,Gen能诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖、抑制多种药物的耐药性等。本研究首先对BP5抑制结肠癌HCT116细胞的作用及其机制展开了研究,研究发现BP5通过诱导G1期细胞周期阻滞、内质网应激以及线粒体介导的caspase依赖性的凋亡途径抑制结肠癌HCT116细胞生长。在此基础上开展了 BP5与抗肿瘤中药单体Gen的联合应用的初步研究,结果发现两者能协同抑制HCT116细胞的生长、诱导细胞凋亡和自噬。此外,通过收集扬州市中医院158例大肠癌病例,对大肠癌的临床分布、病理特征、中医证型及治疗方式等进行回顾性分析,结果表明,结肠癌和直肠癌在年龄、中医证型、治疗方法上具有明显差异,而在性别、病理大体分型、组织学分类、组织分化程度、临床分期、转移情况上并无明显差异性。本课题研究内容共分为三个部分。第一部分法氏囊五肽对结肠癌HCT116细胞增殖的作用及机制目的:探讨BP5对结肠癌HCT116细胞的抗癌作用及其可能机制。方法:用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）测定细胞活力。分别使用碘化丙啶（PI）和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞周期和凋亡率。通过Western blot法检测细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白来分析其作用机制。使用特异性siRNAs对IREI、ATF-6和PERK进行基因沉默实验。用H2DCF-DA绿色荧光探针染色法测定细胞内活性氧（ROS）。分别使用Fluo-3 AM和JC-1染色试剂盒检测细胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位（△Ψm）。结果:BP5对HCT116细胞的增殖具有抑制作用,呈剂量-时间依赖性,并具有诱导细胞凋亡的作用。BP5通过上调p53和p21以及下调Cyclin E1和CDK2诱导G1期细胞阻滞。同时,BP5通过激活未折叠蛋白应答（UPR）效应分子（IRE1α、ATF6、PERK）和下游信号（XBP-1s、eIF2α、ATF4和CHOP）通路,显着诱导了内质网（ER）应激介导的细胞凋亡途径,促进活性氧生成和细胞内Ca2+浓度升高。此外,BP5增加了促凋亡蛋白Bax的表达,减少了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,降低了线粒体膜电位（△Ψm）,导致线粒体向细胞质释放细胞色素c,从而增强了 caspase-9和caspase-3的活性。此外,实验表明,caspase抑制剂（z-VAD-fmk）能显着拮抗BP5对HCT116细胞的抑制作用以及BP5诱导的细胞凋亡。结论:BP5通过诱导G1期细胞周期阻滞、内质网应激以及线粒体介导的caspase依赖性的凋亡途径,从而抑制结肠癌HCT116细胞生长。第二部分法氏囊五肽和金雀异黄素联合应用的初步研究目的:研究BP5和Gen的联合应用对结肠癌HCT116细胞的作用,并探讨其可能的机制。方法:CCK-8法测定细胞活性。Annexin V-APC/7AAD染色法检测细胞凋亡。单丹磺酰尸胺（MDC）染色法检测细胞自噬。蛋白质印迹分析观察细胞凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白。结果:与单用BP5或Gen处理组相比,BP5和Gen联合处理组可通过增加Bax的表达水平,降低Bcl-2的表达水平,提高caspase-3和裂解的caspase-3的活性协同抑制HCT116细胞的生长、诱导细胞凋亡,并通过增加LC3-II和降低p62的表达水平诱导自噬性细胞死亡。结论:BP5和Gen的联合应用可通过诱导HCT116细胞凋亡和自噬显示其协同抗癌作用。第三部分158例大肠癌临床特征回顾性分析目的:探索大肠癌在临床分布、病理特征及诊断和治疗上的临床特点。方法:通过回顾性分析扬州市中医院2016年10月至2018年10月肿瘤科诊断为大肠癌的患者资料158例,将大肠癌分为结肠癌和直肠癌两组,并对两组肠癌患者的性别、年龄、病理大体分型、组织学分类、组织分化程度、临床分期、中医证型、转移情况、治疗方法进行整合分析。结果:1.结直肠癌在性别、病理大体分型、组织学分类、组织分化程度、临床分期、转移情况上差异无统计学意义（P>0.05）。结直肠癌在发病率上均是男性高于女性,结肠癌男性构成比例（62.37%）略低于直肠癌（64.62%）。病理大体分型50%以上为溃疡型,在组织学分类上80%以上为腺癌,少部分为粘液腺癌,其他类型极少,病理分化程度超过半数以上为中分化。结直肠癌中晚期患者所占比例远超过早期患者,单纯淋巴结转移和无转移患者所占比例较高。2.结直肠癌在年龄、中医证型、治疗方法上差异有统计学意义（P<0.05）。在患病年龄上,结直肠癌老年患者多于中青年患者,其中直肠癌中年发病率（33.85%）略高于结肠癌（21.51%）,而青年发病率直肠癌（1.54%）却低于结肠癌（10.73%）。结肠癌老年患者所占比例（67.74%）略高于直肠癌（64.61%）。在中医证型方面,结直肠癌患者以痰湿内停证为主,其次为脾气不足证。结肠癌气血两伤证患者比直肠癌多,直肠癌在肝肾阴虚证、瘀毒内结证及脾肾阳虚证上患者数多于结肠癌。结直肠癌在治疗方式上大多以手术+化疗方式,其次是纯手术治疗,但直肠癌手术+化疗+放疗所占比例大于结肠癌。结论:结肠癌和直肠癌在年龄、中医证型、治疗方法上具有明显差异,而在性别、病理大体分型、组织学分类、组织分化程度、临床分期、转移情况上并无明显差异性。
崔佳莹,许峰巍,彭莹莹,王方圆,孟静岩[7]（2018）在《染料木黄酮抗肿瘤作用研究进展》文中提出染料木黄酮是一种异黄酮类化合物,不仅存在于豆科植物中,还存在于葛根、鸡血藤、山豆根等中草药中。研究表明,染料木黄酮具有抗氧化、抗肿瘤、保护心血管、防治骨质疏松等作用,可通过调节与细胞周期和凋亡相关的基因来抑制体内多种肿瘤细胞的生长,还可协同化疗药物提高化疗的疗效。本文就染料木黄酮在肿瘤发生发展中的作用机制进行综述。
李飞[8]（2017）在《染料木黄酮抑制雄激素受体信号通路抗去势抵抗前列腺癌的体外研究》文中认为研究表明,大豆异黄酮（soy isoflavones）具有抗前列腺癌的作用,但其对去势抵抗前列腺癌（castrate-resistant prostate cancer,CRPC）的作用及机制尚未明确。前列腺癌经去势治疗后,前列腺癌细胞仍可通过从头合成途径（de novo）合成雄激素,从而激活雄激素受体（androgen receptor,AR）信号通路,继而调节基因转录,诱导前列腺特异性抗原（prostate-specific antigen,PSA）分泌及促进增殖,产生去势抵抗。因此,阻断癌细胞内部雄激素从头合成,抑制AR激活是CRPC防治的靶点。目的探讨染料木黄酮（genistein）对去势抵抗前列腺增殖的影响,以及对雄激素信号途径的抑制作用及分子机制,为植物化学物防治CRPC提供实验数据。方法以22RV1、VCa P细胞为CRPC细胞模型,人正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照。（1）CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞免疫化学法检测Ki-67;（2）酶联免疫法检测PSA,二氢睾酮（DHT）,睾酮（T）;（3）Western Blot检测P53、Cyclin D1、PCNA及de novo中各种催化酶表达,包括类固醇生成快速调节蛋白（St AR）、胆固醇调节元件结合蛋白（SREBP）、胆固醇侧链裂解酶（CYP11A1）、由17α羟化酶/20-裂解酶（CYP17A1）、3-羟基类固醇合成酶（3βHSD）、醛酮还原酶（AKR1C3）、5α还原酶2（SRD5A2）及胞浆蛋白、核蛋白中AR的表达;（4）实时荧光PCR检测AR下游基因FKBP5、STEAP1、TMPRSS2表达;（5）激光共聚焦检测AR的表达及胞内定位;（6）免疫共沉淀法检测HSP90与AR的相互作用。结果（1）genistein能有效抑制22RV1、VCa P细胞的增殖能力,且这种作用具有剂量时间效应;（2）genistein抑制CRPC细胞Ki-67、PCNA的表达,抑制CRPC细胞PSA的分泌,阻滞细胞周期于G2/M期;（3）genistein下调CRPC细胞AR的表达,抑制AR的核易位;（4）genistein下调CRPC细胞中AR下游基因STEAP1、TMPRSS2的表达;（5）genistein降低CRPC细胞中雄激素水平,下调从头合成途径关键酶AKR1C3、SRD5A2、CYP11A1及3βHSD的表达。结论Genistein通过下调CRPC细胞从头合成途径中的AKR1C3、SRD5A2、CYP11A1及3βHSD的表达,阻断雄激素的从头合成,抑制AR信号通路的激活及核易位,发挥抗去势抵抗前列腺癌增殖的作用。
李维维,史睿亭,吴素焕[9]（2015）在《Genistein对结肠癌细胞抑制作用及其机制研究进展》文中提出三羟异黄酮（Genistein）是一种存在于豆科植物和齿状植物中的雌激素类天然异黄酮化合物。具有广泛的抗肿瘤药理活性,对肿瘤的预防和治疗有很重要的意义。参阅大量近年来国内外相关文献,就Genistein对结肠癌细胞的抑制作用及作用机制的最新研究进展予以综述。
蒋艳辉,宋鑫[10]（2015）在《基于MicroRNAs及其靶基因的化学预防药物对肿瘤抑制的作用》文中提出化学预防药物包括天然化学预防药物和合成化学预防药物,他不仅可预防肿瘤发生,还可在肿瘤治疗中发挥作用。Micro RNAs（mi RNAs）是一类短链非编码RNA,通过降解m RNA或抑制m RNA翻译的方式调控着众多基因的表达。近年来越来越多研究表明,在多种肿瘤中化学预防药物通过影响mi RNAs及其靶基因的表达发挥对肿瘤的预防和治疗作用,且化学预防药物作用于mi RNAs及其靶基因在肿瘤中的实验研究已经展现出良好的安全性和疗效。基于mi RNAs及其靶基因的化学预防药物对肿瘤抑制的作用有望成为肿瘤研究新的切入点。本文就天然化学预防药物和合成化学预防药物与mi RNAs及其靶基因在肿瘤中的研究进展作一综述。
二、染料木黄酮(genistein)对肿瘤的防治作用及其机制（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、染料木黄酮(genistein)对肿瘤的防治作用及其机制（论文提纲范文）
（1）母代运动和饮食干预对子代成年期糖脂代谢的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文对照缩略词表(按英文字母顺序A-Z) |
| 实验材料 |
| 第一部分 母代运动和饮食干预显着改善生命早期不良营养编程的子代成年期糖脂代谢异常 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果1.1 |
| 讨论1.1 |
| 结果1.2 |
| 讨论1.2 |
| 结论 |
| 第二部分 肠道菌群在介导母代干预调控子代成年期糖脂代谢中的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果2.1 |
| 讨论2.1 |
| 结果2.2 |
| 讨论2.2 |
| 结论 |
| 第三部分 表观遗传修饰可能是解释母代运动和饮食干预调控子代成年期代谢的重要机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果3.1 |
| 讨论3.1 |
| 结果3.2 |
| 讨论3.2 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 中文综述 生命早期营养不良和代谢紊乱：能量代谢的新视角 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间发表文章及主持和参与科研课题 |
| 致谢 |
（2）GPR30在染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡和周期影响中的作用及其机制（论文提纲范文）
| 缩略词表（以字母顺序排列） |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 研究背景 |
| 1.1.甲状腺癌的发病及治疗情况 |
| 1.2.本研究的目的与意义 |
| 1.3.研究内容 |
| 1.4.技术路线 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 1.1.人甲状腺癌细胞株 |
| 1.2.实验仪器与试剂 |
| 1.3.常用实验试剂的配制 |
| 2.实验方法 |
| 2.1.细胞培养 |
| 2.2.实时荧光定量PCR检测雌激素受体及染料木黄酮对其的影响 |
| 2.3.细胞增殖、凋亡和周期检测 |
| 2.3.1 细胞增殖活性检测方法 |
| 2.3.2 细胞凋亡检测方法 |
| 2.3.3 细胞周期检测方法 |
| 2.4.染料木黄酮对SW579细胞的影响机制 |
| 2.4.1.差异基因检测与筛选 |
| 2.4.2.差异表达基因的验证 |
| 2.5.数据分析 |
| 结果 |
| 1.GPR30在染料木黄酮对SW579细胞增殖、凋亡和周期影响中的作用 |
| 1.1.SW579细胞中雌激素受体表达情况及染料木黄酮对其的影响 |
| 1.2.雌激素膜受体GPR30特异性受体阻断剂G15的剂量 |
| 1.3.G15作用前后染料木黄酮对SW579细胞增殖影响 |
| 1.4.G15作用前后染料木黄酮对SW579细胞凋亡影响 |
| 1.5.G15作用前后染料木黄酮对SW579细胞周期影响 |
| 2.染料木黄酮对SW579细胞的影响机制 |
| 2.1.样本RNA质检结果 |
| 2.2.差异表达基因的筛选及GO、KEGG分析 |
| 2.3.转录组测序结果验证 |
| 2.4.肿瘤相关通路及差异表达基因筛选 |
| 讨论 |
| 1.SW579细胞中表达的雌激素受体及染料木黄酮对其影响 |
| 2.染料木黄酮对SW579细胞的增殖、周期和凋亡影响 |
| 3.GPR30在染料木黄酮对SW579细胞影响中的作用 |
| 4.染料木黄酮对SW579细胞的影响机制 |
| 结论 |
| 研究的创新性和展望 |
| 1.研究的创新性 |
| 2.展望 |
| 参考文献 |
| 综述 雌激素及雌激素受体在甲状腺癌中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（3）荸荠皮和浒苔的化学成分及其抗肿瘤、抗菌活性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词一览 |
| 鉴别反应一览 |
| 第一章 绪论 |
| 第二章 可食用植物中具有抗肿瘤作用的活性成分研究进展 |
| 2.1 概述 |
| 2.2 可食用植物中具有抗肿瘤作用的活性成分 |
| 2.2.1 多糖类 |
| 2.2.2 黄酮类 |
| 2.2.2.1 黄酮类单体化合物 |
| 2.2.2.2 黄酮类混合物 |
| 2.2.3 萜类 |
| 2.2.3.1 单萜 |
| 2.2.3.2 倍半萜 |
| 2.2.3.3 二萜 |
| 2.2.3.4 三萜 |
| 2.2.4 生物碱类 |
| 2.2.5 其他 |
| 2.3 展望 |
| 第三章 荸荠皮化学成分及营养成分研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 荸荠皮的化学成分 |
| 3.2.1 化合物名称 |
| 3.2.2 化合物结构 |
| 3.2.3 化合物结构鉴定 |
| 3.3 干燥荸荠皮的营养成分 |
| 3.3.1 一般营养成分 |
| 3.3.2 矿物元素含量 |
| 3.3.3 氨基酸含量 |
| 3.4 实验部分 |
| 3.4.1 仪器及试剂 |
| 3.4.2 药材 |
| 3.4.3 化合物的提取与分离 |
| 3.4.4 营养成分测定 |
| 3.4.4.1 一般营养成分测定 |
| 3.4.4.2 矿物元素含量测定 |
| 3.4.4.3 氨基酸含量测定 |
| 3.5 化合物的物理常数及光谱数据 |
| 第四章 浒苔的化学成分研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 浒苔的化学成分研究结果 |
| 4.2.1 化合物名称 |
| 4.2.2 化合物结构 |
| 4.2.3 化合物结构鉴定 |
| 4.3 实验部分 |
| 4.3.1 仪器及试剂 |
| 4.3.2 药材 |
| 4.3.3 化合物的提取与分离 |
| 4.4 化合物的物理常数及光谱数据 |
| 第五章 抗菌活性研究 |
| 5.1 荸荠皮中部分化合物抗菌活性结果 |
| 5.2 浒苔中部分化合物抗菌活性结果 |
| 5.3 实验部分 |
| 5.3.1 实验仪器与药品 |
| 5.3.2 实验步骤 |
| 5.4 总结及讨论 |
| 第六章 抗肿瘤活性研究 |
| 6.1 荸荠皮中部分化合物体外抗肿瘤活性研究结果 |
| 6.1.1 抗肿瘤活性评价 |
| 6.1.2 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析细胞凋亡情况 |
| 6.1.3 Hoechst 33258荧光染色检测T24细胞凋亡情况 |
| 6.1.4 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色检测T24细胞凋亡情况 |
| 6.1.5 线粒体跨膜电位ΔΨm检测结果分析 |
| 6.1.6 Western blot蛋白印记结果分析 |
| 6.1.7 细胞内ROS检测结果分析 |
| 6.2 浒苔中部分化合物体外抗肿瘤活性研究结果 |
| 6.3 实验部分 |
| 6.3.1 实验仪器与药品 |
| 6.3.2 MTT法测定抗肿瘤活性 |
| 6.3.3 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析细胞凋亡 |
| 6.3.4 Hoechst 33258染色 |
| 6.3.5 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色 |
| 6.3.6 线粒体跨膜电位ΔΨm检测 |
| 6.3.7 Western blot蛋白印记分析 |
| 6.3.8 细胞内ROS检测 |
| 6.4 总结及讨论 |
| 第七章 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 硕士学位期间主要科研成果 |
| 附录 部分化合物图谱 |
（4）染料木黄酮对SW579和TT细胞系增殖、侵袭和转移能力的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1. 前言 |
| 1.1. 甲状腺癌的发病情况 |
| 1.2. 甲状腺癌的分类及治疗 |
| 1.3. 染料木黄酮的抗肿瘤作用 |
| 1.4. 染料木黄酮与基质金属蛋白酶 |
| 1.5. 本研究的目的与意义 |
| 1.6. 研究内容 |
| 1.7. 技术路线 |
| 2. 材料与方法 |
| 2.1. 材料 |
| 2.1.1. 人甲状腺癌细胞株 |
| 2.1.2. 实验试剂 |
| 2.1.3. 实验仪器与耗材 |
| 2.2. 方法 |
| 2.2.1. 实验试剂的配置与保存 |
| 2.2.1.1. 细胞培养液的配制 |
| 2.2.1.2. 冻存液的配制 |
| 2.2.1.3. PBS缓冲液的配制 |
| 2.2.1.4. 染料木黄酮的配制 |
| 2.2.2. 实验方法 |
| 2.2.2.1. 玻璃仪器使用前的消毒处理 |
| 2.2.2.2. 细胞培养 |
| 2.2.2.3. MTT细胞增殖活性检测实验 |
| 2.2.2.4. 细胞基质粘附实验 |
| 2.2.2.5. transwell小室侵袭实验 |
| 2.2.2.6. transwell小室迁移实验 |
| 2.2.2.7. 划痕实验 |
| 2.2.2.8. RT-QPCR实验 |
| 2.2.2.9. 数据分析 |
| 3. 结果 |
| 3.1. 染料木黄酮对Nthy-ori-3-1,SW579和TT细胞增殖能力的影响 |
| 3.2. 染料木黄酮对SW579,TT细胞的粘附能力的影响 |
| 3.3. 染料木黄酮对SW579,TT细胞的侵袭能力的影响 |
| 3.4. 染料木黄酮对SW579,TT细胞迁移能力的影响 |
| 3.5. 染料木黄酮对SW579细胞中MMP-2,MMP-9 mRNA表达的影响 |
| 3.5.1. 总RNA纯度与浓度测定 |
| 3.5.2. 各基因的溶解曲线,溶解峰,扩增曲线 |
| 3.5.3. RT-QPCR检测MMP-2和MMP9基因mRNA的表达水平 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（5）槐角染料木黄酮对电离辐射损伤保护作用的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 槐角染料木黄酮提取工艺的优化 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 槐角染料木黄酮对骨髓电离辐射损伤的保护作用研究 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 槐角染料木黄酮对小肠电离辐射损伤的保护作用研究 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四部分 槐角染料木黄酮通过上调Rassf1a和 Ercc1 表达促进DNA损伤修复 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）法氏囊五肽抑制结肠癌HCT116细胞增殖效应的机制及其与金雀异黄素联合应用的初步研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 法氏囊五肽对结肠癌HCT116细胞增殖的作用及机制 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 药品 |
| 1.3 siRNA |
| 1.4 实验试剂 |
| 1.5 仪器及耗材 |
| 1.6 主要试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 CCK-8法检测细胞活力 |
| 2.3 细胞周期分析 |
| 2.4 细胞凋亡测定 |
| 2.5 细胞内活性氧测定 |
| 2.6 细胞内Ca~(2+)测定 |
| 2.7 线粒体膜电位检测 |
| 2.8 小干扰RNA(siRNA)转染 |
| 2.9 蛋白质印迹分析 |
| 2.10 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 BP5对HCT116细胞、HaCaT细胞和NIH/3T3细胞增殖的影响 |
| 3.2 BP5诱导细胞在G1期阻滞 |
| 3.3 BP5诱导HCT116细胞凋亡 |
| 3.4 BP5通过影响细胞周期蛋白表达水平诱导细胞周期阻滞 |
| 3.5 BP5激活内质网应激、促进活性氧生成和细胞内Ca~(2+)浓度升高 |
| 3.6 BP5诱导线粒体膜电位(△Ψm)降低、触发线粒体介导的细胞凋亡 |
| 3.7 BP5以caspase-3依赖性方式诱导细胞凋亡 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 法氏囊五肽和金雀异黄素联合应用的初步研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 药品 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 耗材及仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 CCK-8法检测细胞活力实验 |
| 2.3 联合指数法分析BP5和Gen疗效 |
| 2.4 细胞凋亡测定 |
| 2.5 MDC染色 |
| 2.6 蛋白质印迹分析 |
| 2.7 LDH 测定 |
| 2.8 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 BP5和Gen联合应用协同抑制HCT116细胞增殖 |
| 3.2 BP5和Gen联合应用促进细胞凋亡 |
| 3.3 BP5和Gen联合应用增加自噬性细胞死亡 |
| 3.4 BP5和Gen联合应用诱导的细胞凋亡具有caspase依赖性 |
| 3.5 自噬能提高BP5和Gen对HCT116细胞活力的协同抑制作用 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 158例大肠癌临床特征回顾性分析 |
| 1 临床资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 研究方法 |
| 1.6 数据统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 结直肠癌性别构成比较 |
| 2.2 结直肠癌年龄构成比较 |
| 2.3 结直肠癌病理大体分型构成比较 |
| 2.4 结直肠癌病理组织学分类构成比较 |
| 2.5 结直肠癌组织分化程度构成比较 |
| 2.6 结直肠癌病理分期构成比较 |
| 2.7 结直肠癌中医证型构成比较 |
| 2.8 结直肠癌转移情况构成比较 |
| 2.9 结直肠癌治疗方式构成比较 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
（7）染料木黄酮抗肿瘤作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 肺癌 |
| 1.1 诱导细胞凋亡 |
| 1.2 抑制侵袭转移 |
| 1.3 增敏化疗药 |
| 2 胃癌 |
| 2.1 抑制肿瘤干细胞 |
| 2.2 抑制侵袭转移 |
| 2.3 增敏化疗药 |
| 3 结肠癌 |
| 4 肝癌 |
| 4.1 抑制肿瘤干细胞 |
| 4.2 增敏化疗药 |
| 5 乳腺癌 |
| 5.1 诱导细胞凋亡 |
| 5.2 抑制侵袭转移 |
| 5.3 抗雌激素作用 |
| 6 妇科肿瘤 |
| 6.1 抑制细胞增殖 |
| 6.2 抑制侵袭转移 |
| 6.3 雌激素作用 |
| 7 结语 |
（8）染料木黄酮抑制雄激素受体信号通路抗去势抵抗前列腺癌的体外研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 第一部分 Genistein抑制CRPC细胞增殖 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验试剂及材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 Genistein抑制CRPC前列腺癌细胞增殖 |
| 3.2 Genistein对CRPC细胞形态的影响 |
| 3.3 Genistein阻滞CRPC细胞周期于G2/M期 |
| 3.4 Genistein降低CRPC细胞Ki-67 表达 |
| 3.5 Genistein下调CRPC增殖抗原PCNA、周期蛋白CyclinD1表达，上调P53的表达 |
| 3.6 Genistein下调CRPC细胞前列腺癌特异性抗原(PSA)的表达水平 |
| 4 小结 |
| 第二部分 Genistein阻断CRPC细胞雄激素受体信号通路 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验试剂与材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 Genistein下调CRPC细胞总蛋白中的AR表达 |
| 3.2 Genistein下调CRPC细胞核蛋白AR的表达 |
| 3.3 Genistein增强蛋白AR与蛋白HSP90的结合 |
| 3.4 Genistein抑制AR信号下游基因STEAP1、TMPRSS2表达 |
| 4 小结 |
| 第三部分 Genistein改变睾酮从头合成途径中关键酶的表达 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验试剂与材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 Genistein抑制CRPC细胞内部的雄激素水平 |
| 3.2 Genistein改变de novo途径关键酶的表达 |
| 4 小结 |
| 全文讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 大豆异黄酮防治前列腺癌的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（9）Genistein对结肠癌细胞抑制作用及其机制研究进展（论文提纲范文）
| 1 Genistein的结构与功能 |
| 2 Genistein抑制肿瘤细胞生长的作用机制 |
| 2.1 作为酪氨酸蛋白激酶抑制剂 |
| 2.2 作为拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ抑制剂 |
| 2.3 弱雌激素与抗雌激素作用 |
| 2.4 抑制肿瘤血管的生成 |
| 2.5 调节细胞周期及诱导细胞凋亡 |
| 2.6 抗氧化作用 |
| 2.7 调节蛋白激酶B信号通路 |
| 3 Genistein与结肠癌 |
| 3.1 Genistein与结肠癌的发生 |
| 3.2 Genistein对结肠癌的抑制作用 |
| 4 总结与展望 |
（10）基于MicroRNAs及其靶基因的化学预防药物对肿瘤抑制的作用（论文提纲范文）
| 1 化学预防药物 |
| 2 Micro RNAs(mi RNAs)简介 |
| 3 天然的化学预防药物与mi RNAs |
| 4 合成化学预防药物与mi RNAs |
| 5 结语与展望 |
四、染料木黄酮(genistein)对肿瘤的防治作用及其机制（论文参考文献）
- [1]母代运动和饮食干预对子代成年期糖脂代谢的影响及机制研究[D]. 周丽媛. 北京协和医学院, 2021(02)
- [2]GPR30在染料木黄酮对人甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡和周期影响中的作用及其机制[D]. 陈志青. 昆明医科大学, 2020
- [3]荸荠皮和浒苔的化学成分及其抗肿瘤、抗菌活性研究[D]. 徐小净. 东南大学, 2019(05)
- [4]染料木黄酮对SW579和TT细胞系增殖、侵袭和转移能力的影响[D]. 赵丹. 昆明医科大学, 2019(06)
- [5]槐角染料木黄酮对电离辐射损伤保护作用的研究[D]. 逄志骏. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [6]法氏囊五肽抑制结肠癌HCT116细胞增殖效应的机制及其与金雀异黄素联合应用的初步研究[D]. 李晶. 扬州大学, 2019(02)
- [7]染料木黄酮抗肿瘤作用研究进展[J]. 崔佳莹,许峰巍,彭莹莹,王方圆,孟静岩. 药物评价研究, 2018(12)
- [8]染料木黄酮抑制雄激素受体信号通路抗去势抵抗前列腺癌的体外研究[D]. 李飞. 成都医学院, 2017(01)
- [9]Genistein对结肠癌细胞抑制作用及其机制研究进展[J]. 李维维,史睿亭,吴素焕. 医学研究与教育, 2015(03)
- [10]基于MicroRNAs及其靶基因的化学预防药物对肿瘤抑制的作用[J]. 蒋艳辉,宋鑫. 中国肺癌杂志, 2015(04)