一、犬化学去细胞神经同种异体移植的神经电生理研究（论文文献综述）
邓熊,黄英如,吴珍元,曾欢欢,李子健[1]（2016）在《参附注射液玻璃化保存的大鼠坐骨神经修复异体神经缺损研究》文中指出目的探讨参附注射液提高大鼠坐骨神经深低温玻璃化保存效果的可行性。方法 SPF级SD雄性大鼠坐骨神经分别在含有不同体积分数参附注射液（0、5%、10%、30%）的玻璃化液（A、B、C、D组）中深低温（-80℃）保存4周,透射电镜观察神经超微结构,Calcein-AM/PI双染色激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察神经生物活性,Western blotting检测Bcl-2、Bax蛋白表达。用保存后的大鼠坐骨神经修复对应Wistar雄性大鼠（A′、B′、C′、D′组）坐骨神经10 mm缺损,术后分期观察大鼠一般情况、坐骨神经功能指数（SFI）,第16周行电生理检测,再生神经组织学观察。结果透射电镜观察,A、B、C、D组均存在不同程度的脱髓鞘改变,但B、C、D组轻于A组;LSCM观察,B、C、D组绿色荧光较强,红色荧光较弱,A组绿色荧光较弱,红色荧光最广;Bcl-2和Bax蛋白表达,B、C、D组与A组间,C、D组与B组间差异显着（P<0.05）,C、D组间差异不显着（P>0.05）。移植术后各期SFI,术后16周后电生理、再生神经有髓纤维数及髓鞘厚度,均显示C′、D′组与A′、B′组间差异显着（P<0.05）,但A′、B′组间及C′、D′组间差异不显着（P>0.05）。术后16周再生神经超微结构,A′、B′组有髓神经纤维数较少、直径较细,分布稀疏,髓鞘较薄;C′、D′组再生有髓神经纤维数量较多,分布广泛、髓鞘较厚。结论参附注射液能提高大鼠坐骨神经玻璃化保存效果,促进异体移植后受体神经再生。
田媛嫒[2]（2016）在《丙酸睾酮对BMSCs复合神经脱细胞支架修复犬坐骨神经缺损的作用》文中研究表明外周神经缺损是临床常见的损伤并发症,该病患者中的大多数终生伴有部分神经功能丧失或残疾。随着组织工程技术研究的飞速发展,应用组织工程化神经移植物替代自体移植修复外周神经缺损的研究已初见成效。本试验采用同种异体骨髓间充质干细胞（BMSCs）和神经脱细胞支架（ANA）制备组织工程化神经,并移植修复模型犬坐骨神经3 cm缺损,同时在修复肢小腿外侧注射丙酸睾酮（TP）,并设工程化神经移植组、支架组、自体神经翻转移植组和缺损组作对照。术后5个月,行神经电生理检测、FG逆行追踪、腓肠肌湿重比率、腓肠肌和修复神经的组织形态学观察。获得结果如下：1.TP-联合组和自体组均恢复运动感觉功能,恢复时间（3.5 M）接近,工程组恢复时间（4 M）稍晚,三组均可正常负重,后肢站立,轻度跛行,其中TP-联合组试验犬可跳跃离地,其他组未见此情况,支架组恢复效果较差,缺损组未恢复运动感觉功能。2.TP-联合组的传导速度患/健侧百分比（33.19±3.59%）与自体组（39.79±12.03%）没有显着性差异（P>0.05）,TP-联合组的波幅患/健侧百分比（A：48.84±3.28%,B：48.06±6.17%）显着高于自体组（A：45.55±3.50%,B：43.25±3.42%）和工程组（A：28.22±1.73%,B：44.97±1.37%）（P<0.05）。3.自体组、TP-联合组、工程组之间的腓肠肌湿重比率（TP-联合组：80.62±0.96%,自体组：76.64±3.93%,工程组：72.02±10.22%）两两之间没有显着性差异,TP-联合组的肌纤维面积患/健侧百分比（48.78±8.18%）与自体组（43.78±11.45%）无显着性差异,显着优于工程组（35.88±8.10%）（P<0.05）。4.解剖观察自体组和TP-联合组的再生神经接近正常神经,明显优于其他组。5.FG逆行示踪显示TP-联合组、工程组之间的背根感觉神经元的荧光量相似,稍低于自体组,TP-联合组的脊髓运动神经元的荧光量稍高于自体组与工程组。6.神经三色染色观察可见TP-联合组的再生有髓神经纤维密度稍高于自体组与工程组,TP-联合组的有髓神经纤维直径患/健侧百分比（47.84±10.38%）与自体组（43.58±12.60%）无显着差异,但极显着高于工程组（33.16±6.72%）（P<0.01）,髓鞘厚度患/健侧百分比（63.48±9.85%）极显着高于自体组（53.76±12.01%）。以上结果表明,TP对BMSCs-ANA工程化神经修复犬坐骨神经缺损具有很好的促进作用。BMSCs-ANA工程化神经和TP联合BMSCs-ANA工程化神经均可用于修复犬3 cm坐骨神经缺损,但后者的修复效果更好,可达到或超过白体神经移植修复效果。
李沿江,黄英如,冼华,吴珍元[3]（2015）在《川芎嗪预处理促进大鼠坐骨神经异体移植后神经再生实验研究》文中研究表明目的探讨用川芎嗪预处理冷保存的大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的可行性。方法 40只Wistar大鼠和40只SD大鼠分别为供体和受体,取供体双侧坐骨神经长15 mm,随机在川芎嗪溶液（0、50、100、200 mg/L,A、B、C、D组,n=20）中4℃冷保存6周,透射电镜观察坐骨神经超微结构,Calcein-AM荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）观察;受体大鼠随机分为A′、B′、C′、D′组（n=10,对应A、B、C、D组）,用冷保存6周的供体神经修复对应组受体坐骨神经10 mm缺损。术后分期行大体观察,检测坐骨神经功能指数（SFI）,术后20周行电生理检测、再生神经图像分析和透射电镜观察。结果大鼠坐骨神经冷保存6周,A组神经纤维严重脱髓鞘变化和轴索萎缩变性、蜂窝状改变,而B、C、D组变化较轻;LSCM结果显示,B、C、D组荧光强度高于A组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义（P<0.05）,C、D组间差异无统计学意义（P>0.05）。术后动物存活至实验结束,各期SFI,20周电生理检测,再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B′、C′、D′组与A′组比较,B′组与C′、D′组比较差异均有统计学意义（P<0.05）,C′、D′组间差异无统计学意义（P>0.05）;术后20周透射电镜观察显示,A′组再生有髓神经纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B′、C′、D′组有髓神经纤维较多、髓鞘较厚,结缔组织增生不明显。结论一定质量浓度的川芎嗪对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,并能促进异体移植后神经的再生。
李沿江,黄英如,王雷,冼华,吴珍元,余学东[4]（2015）在《人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究》文中研究指明[目的]探讨人参皂甙Rb1（Ginsenoside Rb1,G-Rb1）冷保存大鼠坐骨神经对同种异体移植后受体神经再生的影响。[方法]3个月龄SPF级雄性Wistar大鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。切取供体大鼠双侧坐骨神经15 mm长,随机在G-Rb1溶液（0、50、200 mg·L-1）中4℃保存4周（A4、B4、C4组）和6周（A6、B6、C6组）,Western-blot检测供体神经Bcl-2表达,Calcein-AM染色LSCM观察冷保存6周供体神经生物活性。用冷保存6周的供体神经（A6、B6、C6组）修复对应的受体（A、B、C组）坐骨神经10 mm缺损,术后分期行大体观察、坐骨神经功能指数检测,第20周行电生理检测、再生神经组织学观察。[结果]Western-blot检测Bcl-2表达,冷保存4周时,B4组高于A4、C4组（P<0.05）,冷保存6周时,B6、C6组高于A6组,且B6组高于C6组,差异均有统计学意义（P<0.05）。Calcein-AM染色LSCM观察,B6、C6组荧光强度与A6组比较,B6组与C6组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。移植术后各期坐骨神经功能指数,20周电生理检测、再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B、C组与A组比较,B组与C组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;术后20周透射电镜显示,A组再生有髓纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B、C组有髓纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,G-Rb1冷保存的坐骨神经能改善同种异体移植后神经再生效果。
阳运康[5]（2014）在《川芎嗪对组织工程神经修复周围神经缺损作用的实验研究》文中研究指明第一部分川芎嗪对基因修饰或缺血缺氧损伤鼠胚神经干细胞的保护作用目的：构建SD乳鼠神经干细胞体外缺血缺氧损伤及基因修饰模型；探讨TMP对神经干细胞基因修饰与缺血缺氧损伤的保护作用，以及TMP促进神经损伤修复，发挥神经保护作用的可能机制，为TMP作为神经干细胞保护剂提供细胞生物学理论依据。方法：（1）分离SD乳鼠海马神经干细胞（NSCs）进行原代培养，将二代NSCs行神经巢蛋白（Nestin）及诱导分化后的神经丝蛋白（NF-200）与胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光鉴定。取二代神经干细胞行携带EGFP基因的逆转录病毒转染并更换完全培养基，然后按TMP实验组、基因修饰对照组（GM control）、溶媒对照组（Vehicle control）分组，同时设正常对照组（Normal control）。其中TMP实验组在DMEM/F12培养基中分别加入工作浓度为50、100、200和300μg/ml的TMP，溶媒对照组在DMEM/F12培养基中加入0.1%DMSO作为溶剂对照，正常对照组为未行基因修饰的二代神经干细胞。各组均在常规条件培养箱中培养72h。通过MTT比色法、锥虫蓝染色计数及流式细胞仪检测神经干细胞活力和损伤凋亡情况，Quantitative real-time PCR和Westernblotting方法检测凋亡相关因子Bax，Bcl-2和Caspase-3的表达。另取二代NSCs分为TMP实验组（TMP group）、缺血缺氧对照组（OGDcontrol）、溶媒对照组（Vehicle control）和正常对照组（Normalcontrol）分别培养6h。其中缺血缺氧对照组、溶媒对照组和TMP实验组均采用OGD（oxygen-glucose-deprivation）法构建体外缺血缺氧损伤模型，溶媒对照组在缺血缺氧造模前即给予0.1%DMSO作为溶剂对照，TMP实验组则在造模前即刻分别加入工作浓度为50、100、200和300μg/ml的TMP，直至造模结束。正常对照组则不作任何处理在常规条件下培养6h。通过MTT比色法、锥虫蓝染色计数及流式细胞仪检测神经干细胞活力和损伤凋亡情况，Quantitative real-time PCR和Western blotting方法检测凋亡相关因子Bax，Bcl-2和Caspase-3的表达。结果：（1）与正常对照组比较，溶媒对照组和基因修饰对照组NSCs活力均显着降低，细胞死亡率及细胞凋亡率均显着增高（均P＜0.05），而抑凋亡基因Bcl-2mRNA和蛋白表达下调，促凋亡基因Bax、Caspase-3mRNA和蛋白表达上调（均P＜0.05）；但基因修饰对照组与溶媒对照组组间比较上述指标无明显差异（均P＞0.05）；与基因修饰对照组比较，TMP实验组呈一定浓度依赖性，能浓度依赖地减少细胞死亡率及凋亡率，增强细胞增殖活性，且TMP可显着上调基因修饰后NSCs中Bcl-2mRNA和蛋白表达水平，下调Bax、Caspase-3mRNA和蛋白表达水平，但基因修饰对照组和50、100μg/mlTMP组间无明显统计学差异（P＞0.05），200μg/mlTMP组与300μg/mlTMP组间未见明显统计学差异（P＞0.05）。（2）与正常对照组比较，溶媒对照组和缺血缺氧对照组NSCs活力均显着降低，细胞死亡率及细胞凋亡率均显着增高（均P＜0.05），而抑凋亡基因Bcl-2mRNA和蛋白表达下调，促凋亡基因Bax、Caspase-3mRNA和蛋白表达上调（均P＜0.05）；但缺血缺氧对照组与溶媒对照组组间比较上述指标无明显差异（均P＞0.05）；与缺血缺氧对照组比较，TMP实验组呈一定浓度依赖性，能浓度依赖地减少细胞死亡率及凋亡率，增强细胞增殖活性，且TMP可显着上调基因修饰后NSCs中Bcl-2mRNA和蛋白表达水平，下调Bax、Caspase-3mRNA和蛋白表达水平，但缺血缺氧对照组和50、100μg/mlTMP组间无明显统计学差异（P＞0.05），200μg/mlTMP组与300μg/mlTMP组间未见明显统计学差异（P＞0.05）。结论：TMP能够浓度依赖性地对基因修饰后或缺血缺氧损伤的NSCs发挥保护作用，且该作用与其调控凋亡相关因子Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达，抑制细胞凋亡有关，这可能是TMP对周围神经系统发挥保护作用的相关机制之一。第二部分含川芎嗪培养液对组织工程化神经桥接物生物学特性的影响目的：化学法萃取Wistar大鼠脱细胞坐骨神经，构建种植基因修饰神经干细胞的组织工程化神经桥接物，探讨含TMP培养基对桥接物生物学特性的影响，为移植修复周围神经缺损提供理想的桥接体。方法：（1）12只成年健康Wistar雄性大鼠，切取双侧坐骨神经（共24条），每条长约2cm，其中20条按下列顺序进行化学处理:剥除外覆结缔组织，无菌蒸馏水清洗3次。放入3%TritonX-100中震荡24h后无菌蒸馏水清洗3次。放入4%脱氧胆酸钠中室温下震荡24h后无菌蒸馏水清洗3次。④重复23步骤，直至形成的去细胞神经呈乳白色、半透明样。HE染色、透射电镜扫描观察化学去细胞神经组织结构。⑤将化学去细胞神经放入DMEM/F12液中4℃保存备用。（2）取12条去细胞神经水化后在显微镜下用微量加样器注入10ul基因修饰神经干细胞悬液（2106/ml）后分I、II、III三组，I、II组各5条，III组2条，其中I、II组分别在常规DMEM/F12完全培养基和添加有200μg/mlTMP的完全培养基中继续培养1周；取I、II、III三组各2条切片行荧光显微镜、HE染色与免疫组化（Nestin、NF-200、GFAP）染色观察细胞分布与支架结构。（3）另取SD大鼠24只分A、B、C、D4组，每组6只，分别将4℃保存1周Wistar大鼠坐骨神经、I组组织工程化神经、II组组织工程化神经及同种异体SD大鼠坐骨神经依次包埋于皮下，7天后取出各组移植神经行HE染色光镜观察及CD4+和CD8+淋巴细胞侵润数量检测。另取SD大鼠24只分A、B、C、D4组，每组6只，分别将4℃保存1周Wistar大鼠坐骨神经、I组组织工程化神经、II组组织工程化神经及同种异体SD大鼠坐骨神经依次包埋于皮下，7天后取出各组移植神经行HE染色光镜观察及CD4+和CD8+淋巴细胞侵润数量检测。结果：去细胞神经的横切片上可见神经外膜和神经束膜形成的圆形结构,其内部为松散的胶原成分髓鞘及细胞成分基本消失。神经外膜和细胞基底膜结构均较完整。纵切片上可见较多整，齐排列的管道样结构，基本无细胞成分。注射神经干细胞后纵切片上可见神经外膜下和束膜间有较多细胞成份，分布不均。培养1周后两组均有较多增殖与分化神经细胞，基因修饰神经干细胞在去细胞桥神经中生长良好，并且有迁移成行的特性，但II组更明显，与I组差异有显着性（P＜0.05）。皮下包埋后光镜下见蓝色淋巴细胞浸润依次减少，A、B、C组间均有显着差异。C、D组间无显着差异。神经内CD4+和CD8+淋巴细胞侵润数A组最多，D组最少，A、B、C组间均有显着差异。C、D组间无显着差异。结论：异体神经化学萃取法可去除神经中的细胞和髓鞘而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构，并且对神经基底膜主要成分-层粘连蛋白无明显影响。种植神经干细胞并在含TMP培养基中培养后制作的组织工程化神经具有较低免疫原性及正常神经的三维结构，可能成为一种理想的组织工程化人工神经，作为修复周围神经缺损的桥接物。第三部分川芎嗪预处理组织工程化神经桥接物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究目的：研究川芎嗪预处理对组织工程化神经桥接物修复大鼠1.5cm坐骨神经缺损的效果。方法：分别按前述方法制作基因修饰的SD大鼠神经干细胞、脱细胞的Wistar大鼠坐骨神经、种植神经干细胞并在含川芎嗪培养基中共培养1周的组织工程化神经。将55只200-250克成年雌性SD大鼠分为A、B、C、D共4组，A、B、C组各15只，D组10只，实验侧均为右后肢坐骨神经。1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,显露坐骨神经,从梨状肌下缘0.5cm处切除神经1.5cm,分别用4种移植物桥接大鼠1.5cm坐骨神经缺损:含川芎嗪的组织工程化神经组（A组）、脱细胞异体神经组（B组）、异体神经组（C组）、自体神经组（D组）。术后A组术侧小腿三头肌内注射TMP液（16mg/kg/日），其余各组（B、C、D组）注射相同体积0.9%NS，连续注射12周至实验结束。术后2周、12周通过大体观察、神经电生理检测、肌肉湿重称重、荧光显微镜观察、辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果：术后12周大体观察发现A、D组实验侧足趾明显散开，足趾印迹分散，恢复足爪着地行走，右后肢蹬力良好，明显优于B、C组；A组坐骨神经功能指数测定、运动神经传导速度和肌肉湿重恢复均优于B、C组（P<0.05），略差于D组（P>0.05）；荧光显微镜与免疫组化染色检测发现，NSCs能在体内存活、迁移并分化为神经元和胶质细胞，A组优于B、C组；术后12周辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪检测提示A组脊神经节中HRP标记的细胞数较B、C组多（P<0.05），甲苯胺蓝染色发现A组移植段再生神经纤维较多,以有髓神经纤维为主，明显优于B、C组（P<0.05）。结论：种植神经干细胞并在含川芎嗪培养液中培养1周的脱细胞异体神经构成的组织工程化神经桥接物能有效修复大鼠坐骨神经缺损，促进周围神经再生及下肢运动功能的恢复。
郑婷婷[6]（2013）在《猕猴去细胞神经支架移植联合细胞外ATP诱导神经再生的实验研究》文中进行了进一步梳理目的：制备同种异体去细胞神经支架并联合靶肌肉内注射ATP,修复猕猴桡神经缺损,研究这种联合法与单纯去细胞神经支架及自体神经移植修复效果的区别,为其作为自体神经移植替代治疗提供理论依据。方法：切取长4cm直径约为3～3.5mm猕猴下肢神经8段,利用3%TritonX-100及4%脱氧胆酸钠溶液重复消化成为去细胞神经支架；将6只成年雄性猕猴随机分为3组,每组2只,分别为实验组（GroupA）、空白对照组（GroupB）、自体移植组（GroupC）,将这三组做成双侧上臂桡神经缺损模型后做如下处理：A组：同种异体去细胞神经支架修复上臂桡神经缺损,术后前臂伸肌群内每日ATP注射；B组：同种异体去细胞神经支架修复上臂桡神经缺损；C组：自体上臂桡神经原位回植。术后6个月,观察猕猴肢体功能恢复,神经电生理检测桡神经传导速度,甲苯胺蓝染色计算神经轴突数目及平均面积,HE染色观察神经的再生情况,NF免疫组化染色观察神经纤维的形态结构,透射电镜观察神经超微结构。结果：大体观察：术后六个月,三组营养不良性改变均减轻,三组再生神经外观均接近正常神经组织,A、C组肌肉萎缩程度较B组轻,A、C组皮肤感觉及运动功能恢复相似,B组差于A、C组。桡神经传导速度,A组恢复好于B组（P<0.05）,但略差于C组（P<0.05）。再生神经的轴突计数A、B组均小于C组（P<0.05、P<0.0001）,A、B组间无统计学差异（P>0.05）,说明C组术后6个月神经轴突的数量明显好于A、B组；轴突的平均面积A组大于C组（P<0.05）,C组大于B组（P<0.0001）,说明A组的平均面积恢复好于B、C组。结论：1、同种异体去细胞神经支架可以作为神经纤维生长通道,引导神经纤维生长并与组织相容性好,不引起明显排斥反应；2、神经支架移植联合靶肌肉注射ATP比单纯神经支架移植能获得更大程度的恢复,ATP可以促进周围神经再生,并可缓解肌肉萎缩；3、联合移植方案修复神经缺损可能成为自体神经移植不能实现时的替代方法。
马洪斌,张荣明[7]（2013）在《以化学去细胞法处理同种异体神经与周围静脉伴行修复面神经缺损》文中研究指明背景:有研究表明化学去细胞法处理的同种异体神经修复面神经缺损可以取得较好的修复效果。目的:在化学去细胞法处理同种异体神经的基础上探索一种修复面神经缺损更有效的修复方式。方法:将新西兰大白兔随机分为2组,实验组制备面神经颊支缺损动物模型,采用经化学去细胞的同种异体腓肠神经进行移植,且与伴行静脉行外膜缝合;对照组在同样位置的远近端分别切断面神经,但不破坏被切断神经与周围组织的正常解剖关系,再切断处行外膜缝合桥接。结果与结论:修复后3个月两组兔均存活,面部表情基本对称,胡须活动正常,神经移植处未见明显瘢痕及神经瘤形成。电镜观察结果显示,实验组与对照组右侧面神经颊支传导速度,移植体远端吻合口附近5.0mm段有髓神经纤维数量,靶肌肉运动终板计数均差异无显着性意义（P>0.05）。结果证实,化学去细胞同种异体神经与周围静脉伴行修复家兔面神经缺损的方法可以达到与自体面神经原位移植相似的修复效果。
尹华伟[8]（2012）在《CO/O2混合气体干燥保存法在同种异体神经移植中应用的实验研究》文中提出目的将F344到Lewis大鼠实验模型配对方式用于同种异体神经移植研究,并检验该模型是否可同时评估异体神经移植后的免疫排斥反应强烈程度和神经再生功能恢复程度。方法36只受体Lewis大鼠随机分为两组,实验组E和对照粗C,制成右侧坐骨神经10mm神经缺损模型。E组受体鼠以F344大鼠新鲜坐骨神经段15mm移植修复；C组受体鼠以Lewis大鼠新鲜坐骨神经段15mm移植修复。移植术后1周、4周、12周观测取材,分别检测行为学、电生理学、神经肌肉组织病理学、免疫学等指标。结果在移植术后1周、术后4周,E组的免疫学指标血清IL-2、血清IL-6浓度、CD4+/CD8+T细胞比例较C组有明显的升高,差异有统计学意义；在术后4周、术后12周,E组的坐骨神经指数、CAMP的波幅、神经纤维计数、肌纤维截面积较C组指标有明显下降,差异有统计学意义。结论F344到Lewis配对方式可作为于神经异体移植模型,进行行为学、电生理、组织形态学及免疫学研究。目的将CO/O2混合气体干燥保存法用于同种异体神经移植大鼠实验模型中异体神经的保存处理,探索该方法可否降低异体神经的免疫原性、提高功能恢复。方法72只受体Lewis大鼠随机分配至A、B、C、D组,制作成右侧坐骨神经10mm神经缺损模型。A组受体鼠以Lewis大鼠新鲜坐骨神经段15mm移植修复；B组受体鼠以F344大鼠新鲜坐骨神经段移植修复；C组受体鼠以经CO/O2混合气体保存3周的Lewis大鼠坐骨神经段移植修复；D组受体鼠以经CO/O2混合气体保存的F344大鼠坐骨神经段移植修复。移植术后1周、4周、12周观测取材,分别检测行为学、电生理学、神经肌肉组织病理学、免疫学等指标。结果在移植术后1周、术后4周,D组的免疫学指标血清IL-2、血清IL-6浓度、CD4+/CD8+T细胞比例较B组有明显的降低,差异有统计学意义；在术后4周、术后12周,D组的坐骨神经指数、CAMP的波幅、神经纤维计数、肌纤维截面积较B组指标有明显提高,差异有统计学意义。结论CO/O2混合气体干燥保存法运用于大鼠同种异体神经移植,可以达到减弱其免疫性、提高功能恢复的效果。异体神经移植是自体神经移植的一种替代方式,用于修复神经损伤造成的神经缺损。异体神经移植同其他器官移植一样,会导致免疫排斥,限制了神经轴突的生长和功能的恢复。为了减弱免疫排斥反应,提高神经恢复效果,国内外学者进行了广泛研究。现将国内外关于异体神经移植的相关研究综述如下。
吴学建,何江涛,孙士强[9]（2010）在《人脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管修复大鼠坐骨神经缺损》文中进行了进一步梳理目的探讨诱导后的脐带间充质干细胞作为组织工程种子细胞修复大鼠坐骨神经缺损的可行性。方法从正常足月新生儿脐带中分离培养间充质干细胞并诱导分化为神经样细胞,与去细胞神经基膜管共培养以构建组织工程神经;用30只健康成年雄性SD大鼠建立坐骨神经缺损（10mm）的动物模型并随机分成3组:A组为脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管组,B组为单纯去细胞神经基膜管组,C组为自体神经桥接组。术后10周通过神经电生理检测、组织学观察等评测效果。结果在局部观察和肌肉测量、神经电生理检测、组织学观察等方面,脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管组（A组）神经再生及肢体功能情况良好,效果接近于自体神经桥接组（C组）,明显优于单纯去细胞神经基膜管组（B组）。结论脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管构建的组织工程神经可有效促进大鼠坐骨神经缺损（10mm）的修复。
姚俊娜[10]（2010）在《胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经桥接修复周围神经缺损的实验研究》文中认为目的：本研究旨在通过观察脱细胞同种异体神经和胎盘羊膜包裹的脱细胞同种异体神经桥接移植修复实验犬坐骨神经缺损后4个月的一般状态、形态学、比目鱼肌动作电位、坐骨神经传导速度等指标,探讨胎盘羊膜包裹的脱细胞同种异体神经移植技术的优缺点及可行性。方法：将实验犬随机分成三组：A组、B组和C组,每组5只。A组：脱细胞同种异体神经移植组；B组：胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经移植组；C组：同种异体神经供体组。制备胎盘羊膜和脱细胞同种异体神经并检测成功后,将A组及B组实验犬麻醉分别行脱细胞同种异体神经移植术和胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经移植术。术后16周运用神经电生理学、病理学等技术手段观察两组实验犬移植段神经横断面轴突数目、髓鞘HE染色、免疫组化染色、比目鱼肌的动作电位、双侧坐骨神经传导速度的差异。用SPSS17.0软件对实验数据进行统计处理,所有资料用x±S表示,组间比较采用t检验,P<0.05表示差异有显着性。结果：（1）一般情况：术后16周,A组实验犬神经再生修复效果不佳,足部及小腿长期红肿、溃疡不愈合；B组实验犬神经功能开始恢复,小腿肌肉肌力部分恢复,实验犬右后肢能够站立。（2）移植段神经大体观察：B组实验犬较A组移植段神经连续性好,吻合口周围粘连及炎性反应轻。（3）组织学观察：B组与A组相比可见较多雪旺细胞增殖及大量再生的神经纤维。（4）轴突计数：B组轴突密度明显高于A组,差异有统计学意义（P<0.05）。（5）肌电图测量：B组实验犬的比目鱼肌诱发电位波幅明显高于A组,差异有统计学意义（P<0.05）。（6）神经电生理检测：A组和B组患侧坐骨神经传导速度未见显着差异（P>0.05）。结论：（1）胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体移植神经具有良好的组织相容性,可用于实验犬坐骨神经缺损的修复。（2）胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经修复与单纯脱细胞同种异体神经移植修复相比更有利于轴突再生。（3）胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经移植修复术可改善神经形态学变化、提高实验犬移植神经的修复质量,效果优于单纯脱细胞同种异体神经移植修复术。（4）胎盘羊膜包裹同种异体神经修复在恢复移植神经传导速度方面与单纯脱细胞同种异体神经移植修复未见明显差异。
二、犬化学去细胞神经同种异体移植的神经电生理研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、犬化学去细胞神经同种异体移植的神经电生理研究（论文提纲范文）
（1）参附注射液玻璃化保存的大鼠坐骨神经修复异体神经缺损研究（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要试剂和仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 玻璃化保存液的配制 |
| 2.2 Calcein-AM、PI荧光染色剂的配制 |
| 2.3 动物模型分组 |
| 2.4 坐骨神经玻璃化保存 |
| 2.5 坐骨神经同种异体移植 |
| 2.6 检测指标 |
| 2.6.1 玻璃化保存神经电镜观察 |
| 2.6.2玻璃化保存神经SCs活性检测 |
| 2.6.3 Western blotting检测玻璃化保存神经Bcl-2、Bax蛋白表达 |
| 2.6.4 移植后一般情况 |
| 2.6.5 坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)检测 |
| 2.6.6 再生神经电生理检测 |
| 2.6.7 再生神经图像分析 |
| 2.6.8 再生神经电镜观察 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 玻璃化保存神经电镜观察 |
| 3.2 保存后神经SCs活性 |
| 3.3 Western blotting检测Bcl-2、Bax蛋白表达 |
| 3.4 移植后一般情况 |
| 3.5 SFI比较 |
| 3.6 再生神经电生理指标 |
| 3.7 再生神经图像分析 |
| 3.8 再生神经超微结构 |
| 4 讨论 |
（2）丙酸睾酮对BMSCs复合神经脱细胞支架修复犬坐骨神经缺损的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 组织工程化神经修复外周神经缺损的研究进展 |
| 1.1 外周神经的结构与功能 |
| 1.2 外周神经的缺损修复机理 |
| 1.3 外周神经缺损的临床治疗方法 |
| 1.4 构建组织工程化神经的要素 |
| 1.4.1 种子细胞的选择 |
| 1.4.1.1 施旺细胞 |
| 1.4.1.2 胚胎干细胞 |
| 1.4.1.3 神经干细胞 |
| 1.4.1.4 骨髓间充质干细胞 |
| 1.4.1.5 脂肪干细胞 |
| 1.4.2 支架材料的选择 |
| 1.4.2.1 天然生物支架材料 |
| 1.4.2.2 天然高分子材料 |
| 1.4.2.3 不可生物降解的合成材料 |
| 1.4.2.4 可生物降解的合成材料 |
| 1.4.3 生物活性因子的选择 |
| 1.4.3.1 神经生长因子 |
| 1.4.3.2 脑源性神经营养因子 |
| 1.4.3.3 神经营养素-3 |
| 1.4.3.4 睾酮 |
| 1.4.3.5 胰岛素 |
| 1.5 组织工程化神经的构建 |
| 1.5.1 种子细胞植入支架的过程 |
| 1.5.2 组织工程化神经的体外培养 |
| 1.6 组织工程化神经在修复外周神经缺损中的应用 |
| 1.7 存在的问题及展望 |
| 第二章 组织工程化神经的构建 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.1.1 试剂与药品 |
| 2.1.1.2 主要试剂的配制方法 |
| 2.1.1.3 主要仪器设备与耗材 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.2.1 同种异体神经脱细胞支架的制备 |
| 2.1.2.2 组织工程化神经的构建 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 脱细胞支架的鉴定结果 |
| 2.2.2 BMSCs的分离与鉴定 |
| 2.2.3 组织工程化神经的鉴定结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 丙酸睾酮对BMSCs复合同种异体神经脱细胞支架修复犬坐骨神经3cm缺损作用的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.1.1 试验动物 |
| 3.1.1.2 试剂与药品 |
| 3.1.1.3 主要试剂的配制方法 |
| 3.1.1.4 主要仪器设备与耗材 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.2.1 犬坐骨神经缺损模型的制备和组织工程化神经的桥接修复 |
| 3.1.2.2 术后一般观察 |
| 3.1.2.3 神经电生理学评估 |
| 3.1.2.4 FG逆行追踪 |
| 3.1.2.5 组织学观察 |
| 3.1.2.6 统计学处理 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 移植修复后模型犬的眼观恢复效果 |
| 3.2.2 神经电生理学检测 |
| 3.2.3 FG逆行追踪 |
| 3.2.4 解剖观察结果 |
| 3.2.5 腓肠肌组织形态学观察 |
| 3.2.6 移植物组织学观察 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 丙酸睾酮和BMSCs-ANAs工程化神经在修复犬坐骨神经缺损中的作用 |
| 3.3.2 工程化神经移植过程中的注意事项 |
| 3.3.3 试验动物的护理 |
| 3.3.4 神经电生理检测时的注意事项 |
| 3.3.5 FG逆行追踪检测时的注意事项 |
| 3.3.6 组间比较方法的改进 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1. 1实验动物 |
| 1. 2 主要试剂和仪器 |
| 1. 3 实验方法 |
| 1. 4 检测指标 |
| 1. 5 统计学分析 |
| 2 结 果 |
| 2. 1 Western - blot 检测 Bcl - 2 蛋白表达 |
| 2. 2 冷保存神经 SCs 活性 |
| 2. 3 移植后大体观察 |
| 2. 4 坐骨神经功能指数 |
| 2. 5 神经电生理检测 |
| 2. 6 再生神经图像分析 |
| 2. 7 再生神经电镜观察 |
| 3 讨 论 |
（5）川芎嗪对组织工程神经修复周围神经缺损作用的实验研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 川芎嗪对基因修饰或缺血缺氧损伤鼠胚神经干细胞的保护作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图表 |
| 第二部分 含川芎嗪培养液对种植神经干细胞的脱细胞神经桥接物的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图表 |
| 第三部分 组织工程化神经联合川芎嗪移植修复大鼠坐骨神经缺损 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图表 |
| 全文总结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的主要研究成果 |
（6）猕猴去细胞神经支架移植联合细胞外ATP诱导神经再生的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述：同种异体去细胞神经支架的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）以化学去细胞法处理同种异体神经与周围静脉伴行修复面神经缺损（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 化学去细胞同种异体神经移植后兔大体形态及移植段神经的一般形态 |
| 2.3 化学去细胞同种异体神经移植后兔移植段神经动作电位变化 |
| 2.4 化学去细胞同种异体神经移植后兔有髓神经纤维形态及密度 |
| 2.5 化学去细胞同种异体神经移植兔移植段组织超微结构 |
| 2.6 化学去细胞同种异体神经移植兔靶肌肉运动终板形态 |
| 3 讨论 |
（8）CO/O2混合气体干燥保存法在同种异体神经移植中应用的实验研究（论文提纲范文）
| 第一部分 F344到Lewis大鼠神经移植后免疫反应及神经生长指标观察 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引文 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 CO/O_2混合气体干燥保存法在同种异体神经移植中应用的实验研究 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引文 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 综述：异体神经移植的研究进展 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 参考文献 |
| 博士研究生阶段发表的论文 |
| 博士研究生阶段获得的奖励 |
| 致谢 |
（10）胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经桥接修复周围神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验 |
| 第一部分 脱细胞同种异体神经的制备 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药品和试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 胎盘羊膜的制备 |
| 2.3 犬脱细胞神经的制备 |
| 2.4 检测制备的犬脱细胞同种异体神经 |
| 第二部分 胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经桥接修复周围神经缺损的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药品和试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 手术方法 |
| 2.3 指标观察与方法 |
| 3. 统计方法 |
| 4. 结果 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 肌电图测量及分析 |
| 4.3 神经电生理检测 |
| 4.4 两组移植段神经的大体观 |
| 4.5 组织学观察 |
| 4.6 轴突计数 |
| 4.7 移植段神经免疫组化染色 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 论文发表情况 |
| 参与科研项目 |
| 致谢 |
四、犬化学去细胞神经同种异体移植的神经电生理研究（论文参考文献）
- [1]参附注射液玻璃化保存的大鼠坐骨神经修复异体神经缺损研究[J]. 邓熊,黄英如,吴珍元,曾欢欢,李子健. 中草药, 2016(23)
- [2]丙酸睾酮对BMSCs复合神经脱细胞支架修复犬坐骨神经缺损的作用[D]. 田媛嫒. 西北农林科技大学, 2016(02)
- [3]川芎嗪预处理促进大鼠坐骨神经异体移植后神经再生实验研究[J]. 李沿江,黄英如,冼华,吴珍元. 中草药, 2015(08)
- [4]人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究[J]. 李沿江,黄英如,王雷,冼华,吴珍元,余学东. 中国矫形外科杂志, 2015(04)
- [5]川芎嗪对组织工程神经修复周围神经缺损作用的实验研究[D]. 阳运康. 重庆医科大学, 2014(03)
- [6]猕猴去细胞神经支架移植联合细胞外ATP诱导神经再生的实验研究[D]. 郑婷婷. 遵义医学院, 2013(S1)
- [7]以化学去细胞法处理同种异体神经与周围静脉伴行修复面神经缺损[J]. 马洪斌,张荣明. 中国组织工程研究, 2013(18)
- [8]CO/O2混合气体干燥保存法在同种异体神经移植中应用的实验研究[D]. 尹华伟. 复旦大学, 2012(02)
- [9]人脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管修复大鼠坐骨神经缺损[J]. 吴学建,何江涛,孙士强. 中华显微外科杂志, 2010(06)
- [10]胎盘羊膜包裹脱细胞同种异体神经桥接修复周围神经缺损的实验研究[D]. 姚俊娜. 郑州大学, 2010(02)