一、注意防治猪萎缩性鼻炎(论文文献综述)
常海波[1](2022)在《猪萎缩性鼻炎有效性防控措施》文中认为猪萎缩性鼻炎属于慢性、传染性呼吸道疾病,是由产毒素多杀性巴氏杆菌与支气管败血波氏杆菌感染造成的,不仅会造成生猪出现呼吸道疾病症状,还会造成生猪生长发育放缓、严重影响了养殖场的正常饲养生产。本文将对猪萎缩性鼻炎进行详细地论述,为养殖户与相关工作人员提供参考,降低猪萎缩性鼻炎的患病率,提高养殖户的经济效益。
张丙周[2](2020)在《副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究》文中提出猪细菌性疾病是一类由多种细菌性病原引起的疾病,其病原具有种类众多、血清型多、毒力因子复杂、传播能力强、耐药问题突出以及多种病原混合感染等特点,严重危害着我国猪群的健康。病原感染具有明显的时空分布,开展病原学调查有助于制定准确防的控策略。近些年,由于抗生素滥用导致的耐药问题愈发严重,细菌病防控也变得越来越困难,逐渐成为限制我国养殖业发展的关键因素,建立在敏感药物筛选基础上的合理用药可有效防控疾病,且提升猪产品的食用安全性。副猪嗜血杆菌是临床上危害猪群健康最严重的细菌性病原之一,能够引起猪只多发性浆膜炎、脑膜炎、支气管肺炎和关节炎等临床疾病,其致病因子众多,致病机制复杂。因此,副猪嗜血杆菌详细的致病机制仍然有待深入研究。群体感应系统是一种调控细菌自身功能与细菌之间信号交流的重要功能系统,对细菌生理特性、生物膜形成、细菌耐药性和毒力等特性的调节发挥着重要的作用,但并未见其在副猪嗜血杆菌中的报道。因此,本试验开展了群体感应系统与副猪嗜血杆菌致病机制的研究,希望为副猪嗜血杆菌病防控提供新思路。本研究首先调查了我国猪场常见细菌性病原的流行情况,并分析了其流行规律和耐药现状;然后以副猪嗜血杆菌为研究对象,阐述了群体感应系统与副猪嗜血杆菌生物学功能、生物膜形成和毒力等特性的相关性;进一步利用RNA-Seq技术研究了群体感应系统导致副猪嗜血杆菌特性变化的可能机制;最后发现了群体感应系统调节副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制和群体感应系统AI-2分子的受体蛋白Rbs B1。主要研究结果如下:1.猪场细菌性病原的流行特征及耐药性研究为了给猪场常见细菌病提供有效的防控指导,试验调查分析了我国猪场常见细菌性病原及其流行规律和耐药机制。2013-2017年,从全国16个不同省份的9661个猪场收集了44,175份临床样品。通过细菌分离鉴定,可知存在于我国猪场的主要细菌性病原有猪链球菌(38.0%)、副猪嗜血杆菌(21.9%)、多杀性巴氏杆菌(7.7%)、致病性大肠杆菌(14.4%)、胸膜肺炎放线杆菌(0.7%)、支气管败血波氏杆菌(3.4%)、沙门氏菌(5.1%)和红斑丹毒丝菌(2.0%)。其中猪链球菌(15.3%-18.6%)、致病性大肠杆菌(4.3%-9.9%)、胸膜肺炎放线杆菌(0.1%-0.5%)和沙门氏菌(1.6%-3.7%)的分离率呈现逐年增高的趋势,而副猪嗜血杆菌(11.6%-7.3%)和红斑丹毒丝菌(1.6%-0.6%)的分离率则出现了一定的下降,但是猪链球菌和副猪嗜血杆菌仍然是我国猪场分离率最高的两种细菌性病原。血清型分型结果显示,猪链球菌的最主要血清型仍然为血清2型,但血清2型菌株的分离率自2013年至2017年减少了约20%;副猪嗜血杆菌的流行优势血清型则由血清4型变为血清5型。季节性流行特征结果显示猪链球菌和副猪嗜血杆菌在炎热季节分离率较高,而多杀性巴氏杆菌则在2-4月份及10月份分离率较高。细菌耐药性试验结果显示,猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌对常见的8种类型(氨基糖苷类、大环内酯类、林可霉素类、四环素类、多粘菌素,磺胺类,β-内酰胺类和喹诺酮类抗生素)抗生素均表现出了较高的耐药率,而且多数细菌耐药率呈现出了逐年增高的现象。2.副猪嗜血杆菌Lux S/AI-2群体感应系统的功能研究通过分析不同菌株的基因组,发现群体感应系统广泛存在于多数细菌之中。为了探索群体感应系统对副猪嗜血杆菌的调控作用,构建了副猪嗜血杆菌的lux S基因缺失株(Δlux S)和互补菌株(C-lux S),并利用亲本菌株和这两株重组菌株比较分析了群体感应系统对副猪嗜血杆菌在生长特性、生物膜形成和毒力的影响。结果发现,副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失后,其抵抗热应激和氧化应激的能力分别减弱了23.0%和25.7%,不同温度下细菌自身凝集能力和凝集红细胞的能力极显着减弱,粘附PK-15细胞的能力下降了约117倍,对小鼠的致病力下降约10倍,在小鼠不同组织的定植能力也均显着减弱,但是细菌抵抗渗透压应激的能力增强了23.7%,生物膜形成能力也显着增强。因此,群体感应系统广泛参与了副猪嗜血杆菌多种生理功能的调节。3.副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失株转录组学研究在副猪嗜血杆菌生长的稳定期前期收集了HPS2、Δlux S和C-lux S菌株,提取RNA后,去除宿主DNA。经RNA-Seq测序,获得了HPS2、Δlux S和C-lux S菌株转录样本的大量Reads。再通过数据过滤、序列比对和转录差异基因的富集等分析发现,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株出现了232个上调表达基因和212个下调表达基因,主要参与了碳代谢、RNA降解、三羧酸循环(TCA)等生物过程和转运、多种蛋白水解酶活性、离子跨膜运输、跨膜信号接收和信号受体活性等生物功能。同时,转录组学结果显示群体感应系统参与了副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制以及发现了参与群体感应系统功能调节的rbs B1基因。4.群体感应系统调控副猪嗜血杆菌抵抗热应激的研究HPS2、Δlux S和C-lux S菌株的转录组学结果显示,参与HPS热应激调节的多种基因均出现了转录水平的差异表达。本试验利用定量检测的方法,验证了这些基因的转录水平。结果发现,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株的rse A基因出现了显着的转录上调,rpo E,rse B,deg S,clp P和htr A基因出现了显着的转录下调,初步验证了副猪嗜血杆菌利用群体感应系统调控htr A基因的转录水平,进而调控其抵抗热应激的分子机制。为了进一步验证rse A和rpo E基因在调控副猪嗜血杆菌热应激中的作用,构建了副猪嗜血杆菌Δrse A和Δrpo E基因缺失株,证明了在副猪嗜血杆菌调控热应激中的rse A和rpo E基因分别发挥了负向调控作用和正向调控作用。5.受体蛋白Rbs B1在副猪嗜血杆菌群体感应系统中的作用HPS2、Δlux S和C-lux S菌株的转录组结果也显示,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株的rbs B1基因出现了显着的表达下调。通过同源序列分析发现,副猪嗜血杆菌的rbs B1基因与具有群体感应系统的放线共生放线杆菌(IDH781菌株)以及流感嗜血杆菌(86-028NP菌株)rbs B1基因序列同源性分别高达72.4%和73.3%。因此,我们猜测rbs B1基因在副猪嗜血杆菌中可能发挥着与放线共生放线杆菌和流感嗜血杆菌的rbs B1基因类似的功能。试验利用构建的副猪嗜血杆菌rbs B1基因缺失株Δrbs B1和原核表达蛋白Rbs B1,证明了Rbs B1蛋白为副猪嗜血杆菌群体感应系统中AI-2分子的受体蛋白。试验结果显示,AI-2分子的浓度在Δrbs B1菌中的降低速度显着低于HPS2亲本菌株,而且AI-2分子的吸收与转运与Rbs B1蛋白的含量之间存在剂量依赖关系。该发现进一步完善了副猪嗜血杆菌群体感应系统的调控通路。综上所述,本文发现了2013-2017年我国部分猪场中常见细菌性病原的感染特点、耐药现状,为细菌病防控提供了参考;发现副猪嗜血杆菌存在群体感应系统,且该系统与副猪嗜血杆菌自身多种重要特性的改变密切相关;阐明了副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制以及发现了群体感应系统的受体蛋白,该研究为群体感应系统的深入研究奠定了基础。
马宝刚[3](2020)在《猪萎缩性鼻炎的防治技术》文中进行了进一步梳理猪萎缩性鼻炎是一种常见的传染性呼吸道疾病,严重影响养猪业的发展,本文综述了该病的致病原因、临床症状、治疗方法和防控措施,以期为生产提供借鉴。
赵思远[4](2019)在《猪萎缩性鼻炎的防治》文中研究指明猪萎缩性鼻炎(Atrophic Rhinitis)是猪的一种慢性传染病,它可能是由多种细菌或者刺激性物质引起的。其特征表现为在感染过程中,骨骼的结构或鼻甲变得纤细,最终导致鼻组织受损永久萎缩或坏死。它的主要病原是支气管毒博特氏菌(Bordetella bronchiseptica),多数是由支气管败血波氏杆菌引发,也有的是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocidia, PMT)所引发的。多杀性巴氏杆菌是一种小的、革兰染色阴性的杆菌,广泛存在于家养和野生动物的呼吸道和肠道内,当宿主的抵抗力下降时,即可发病。
顾宝勇,钱明诗,封士军[5](2018)在《猪萎缩性鼻炎的流行特点与防治》文中提出猪萎缩性鼻炎的病原是支气管败血波氏杆菌,在养猪生产中十分广泛,本文主要论述了猪萎缩性鼻炎的流行特点与防治,供参考。
叶延瑞[6](2018)在《某集团猪场萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控研究》文中进行了进一步梳理猪传染性萎缩性鼻炎(Swine atrophic rhinitis,AR)是由支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)和产毒素多杀性巴氏杆菌(toxigenic Pasteurella multocida,T+Pm)引起的猪的一种多发性慢性呼吸道传染病。在1830年,猪传染性萎缩性鼻炎在德国发现,此后在英国、法国、美国、加拿大、前苏联相继发生,我国则是在1964年首次从英国进口“约克”种猪发现。随着规模化猪场的程度越来越高,人们对经济性疾病的重视度也越来越高,AR就是典型的经济性疾病,且AR的发病体现在临床症状上代表该猪群已经严重感染了,在感染AR的初、中期肉眼是看不出任何症状的,当发现有临床症状表现时,通常已造成了严重的经济损失。本研究主要分为以下四个部分:1、屠宰厂病变调查:通过调查该集团5个分公司共108头肉猪,锯猪鼻子拍照并评分;发现AR的发病率达到75%以上,甚至D公司发病率达到100%,整个集团中度病变以上发病率为36.11%。2、病原菌的分离与鉴定:通过使用唾液采集试剂盒对养殖场的15群猪采集15份样品。实验室检测显示,15份样品中波氏杆菌检出11份样品阳性,检出率为73%;多杀性巴氏杆菌检出5份样品阳性,检出率为33%。3、疫苗的安全性试验:试验选择55头怀孕母猪,其中50头免疫瑞立胜疫苗,5头为空白对照组,监测免疫后的体温升高情况和副反应情况。试验结果显示免疫后母猪平均体温低于39.5℃,属正常免疫应答,副反应结果显示所有免疫母猪均未出现肿块,大部分母猪采食正常。4、疫苗的效果跟踪及评估:在该集团某猪场健康经产母猪3000多头,选一批一个月内分娩的怀孕母猪约700头分别在产前8周和4周免疫瑞立胜,跟踪免疫后上市肉猪的数据,如料肉比、日增重、上市天龄等。试验结果显示从上市肉猪数据来看,上市均重,上市率、料肉比、上市天龄和日增重等试验组有明显的优势。本研究通过屠宰厂病变调查和实验室检测,了解该集团猪场AR的发病情况。并通过疫苗的安全性试验及疫苗的免疫效果跟踪,为该集团对AR防控的提供了依据。对AR的整体防控手段也提供了更多素材。
王美芬[7](2018)在《猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)单克隆抗体的制备》文中研究说明在当今世界范围内,猪呼吸道疾病综合征(PRDC)给现代集约化养猪业造成了严重的经济损失。其中由细菌继发感染导致的发病占据相当的比例,因此对发病猪群进行呼吸道细菌性病原的分离鉴定及药敏试验对猪呼吸道疾病的诊断及临床用药具有重要的参考意义,同时亦可为后续的研究提供实验材料和研究依据。当前对我国猪群危害严重的细菌病是猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病。猪链球菌是一种重要的人畜共患病原,可以引起猪和人类的多种疾病。目前,根据荚膜抗原特异性,猪链球菌可以分为33个血清型,研究表明其血清型与致病性具有一定的相关性。副猪嗜血杆菌病是当前我国猪群的头号细菌继发感染性疾病,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。多杀性巴氏杆菌在猪群的感染也非常普遍,由产毒素性多杀性巴氏杆菌(toxigenic Pasteurella multocida,T+Pm)感染导致的猪萎缩性鼻炎(Swine atrophic rhinitis,AR)是一种世界性的猪病。由T+Pm分泌产生的多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin,PMT)是萎缩性鼻炎的主要致病因子,单独接种PMT可以在试验猪体内复制AR的所有主要症状。该毒素是一种蛋白质,分子量约为146kDa,针对PMT蛋白及其抗体的检测是目前诊断AR的重要手段。因此,通过制备针对PMT的单克隆抗体建立检测PMT的免疫学方法具有重要意义。详细研究如下:1.猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离和猪链球菌血清型鉴定对江苏、浙江、山东、广西、山东等省送检的84份肺脏、脾脏等病料组织进行了细菌分离和培养,通过对菌落进行形态学、染色特性鉴定,将疑似菌株用种特异性引物进行PCR鉴定或用16S rRNA基因通用引物PCR扩增后进行测序鉴定。一共分离到如下菌株:35株猪链球菌、13株副猪嗜血杆菌、10株多杀性巴氏杆菌、7株支气管败血波氏杆菌、3株传染性胸膜肺炎放线杆菌。其中猪链球菌是最主要的病原,通过多重PCR技术对本实验分离到的35株猪链球菌进行分型,血清型分布如下:除了 2株不能分型外,其余分别为2型、9型、16型、8型、3型、29型、25型、31型、4型、18型,所对应的细菌数量分别为5株、3株、1株、2株、1株、1株、1株、1株、1株、1株,其中2型和9型为优势血清型。2.猪呼吸道疾病综合征细菌的耐药性分析采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法,对35株猪链球菌、13株副猪嗜血杆菌和10株多杀性巴氏杆菌进行耐药性分析,结果显示所分离到的猪链球菌对头孢噻肟和青霉素较敏感,敏感率分别为97%和94.3%,其次为阿莫西林,敏感率为86%,所分离到的猪链球菌对林可霉素、卡那霉素和四环素表现出较高的耐药率,耐药率分别为86%、77.2%和78%,对甲氧苄啶的耐药率为62.8%。多重耐药性结果显示只有1株SS对以上11种抗生素全部敏感,其中耐4种和3种抗生素的细菌最多,分别为11株和10株,耐7种、6种、5种、2种、1种抗生素的SS分别为1株、1株、6株、3株、2株。HPS对氟苯尼考和恩诺沙星的敏感性最强,敏感率均为100%,其次为阿莫西林和多西环素,敏感率均为92.3%。HPS耐5种抗生素的有3株,耐4种抗生素的有1株,耐3种抗生素的有2株。10株巴氏杆菌绝大多数对头孢噻肟、青霉素G和阿莫西林较敏感,而对林可霉素、磺胺异恶唑不敏感,同时获得一株具有磺胺药物耐药性的菌株LH4。对LH4进行质粒提取,获得一个同时携带链霉素和磺胺抗性基因strA和sulⅡ的质粒 pLH4。3.多杀性巴氏杆菌毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定为了建立检测产毒素型巴氏杆菌的免疫学检测方法,以原核表达并纯化后的重组PMT蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术,通过数次亚克隆以及间接ELISA方法的筛选过程,制备并鉴定出3株能够稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E3、5G6和2H4。Western blot结果证明这3株单克隆抗体均能够与重组PMT和T+Pm发生特异性反应。单抗3E3、5G6和2H4的细胞上清效价分别为1:3200、1:3200和1:6400。传代培养至20代时,检测分泌的抗体效价基本一致,说明三株杂交瘤细胞株能够连续传代并且稳定分泌抗体。单抗亚类鉴定结果表明单抗5G6和3E3属于IgG1亚类,2H4属于IgG2a亚类,3株单抗轻链均为κ型。相加实验证明3株单抗的抗原识别位点相同。
夏道伦[8](2016)在《猪萎缩性鼻炎的综合防控措施》文中研究指明猪萎缩性鼻炎是猪的一种慢性接触性呼吸道传染病,该病是以患病猪出现泪斑、打喷嚏、鼻甲骨萎缩或消失、鼻骨变形扭曲,并伴随有眼结膜炎等为主要发病特征,且严重者甚至会导致患猪出现流鼻血、歪鼻等典型发病症状,严重影响患猪的生长发育,进而会导致猪群的饲料转化率降低、继发感染明显增多,从而给养猪场户带来极大的经济损失。但对于目前绝大部分养猪场户来讲,一般对
夏道伦[9](2016)在《猪萎缩性鼻炎综合防控措施》文中研究说明猪萎缩性鼻炎是猪的一种慢性接触性呼吸道传染病。该病是以患病猪出现泪斑、打喷嚏、鼻甲骨萎缩或消失、鼻骨变形扭曲,并伴随有眼结膜炎等为主要发病特征,严重者甚至会导致患猪出现流鼻血、歪鼻等典型的猪萎缩性鼻炎发病症状,严重影响患猪的生长发育,导致猪群的饲料转化率降低、继发感染明显增多,从而给养猪场户带来极大的经济损失。因此,养猪场(户)在猪病的防治上,应对猪萎缩性鼻炎引起足够重视。
张善超,张辉[10](2015)在《猪传染性萎缩性鼻炎(AR)的防治》文中提出猪的萎缩性鼻炎(AR)是危害全球养猪业的重要疾病之一,以鼻甲骨萎缩为特征,严重病例还可以表现鼻面部变形(鼻部变短和鼻侧歪),此病的发生可直接影响猪的生长,还常引起其他病原的继发感染,使整群猪的生产性能降低,可造成严重的经济损失。
二、注意防治猪萎缩性鼻炎(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、注意防治猪萎缩性鼻炎(论文提纲范文)
(1)猪萎缩性鼻炎有效性防控措施(论文提纲范文)
1病原 |
2临床症状 |
3防治措施 |
3.1预防措施 |
3.1.1?科学化饲养管理 |
3.1.2?提高饲养环境 |
3.1.3?科学设定日粮配比 |
3.2治疗方法 |
(2)副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表(Abbreviation) |
第一章 文献综述 |
1.1 猪场细菌性疾病概述 |
1.1.1 我国猪细菌性疾病的流行特点 |
1.1.2 猪链球菌病 |
1.1.3 副猪嗜血杆菌病 |
1.1.4 猪萎缩性鼻炎 |
1.1.5 猪大肠杆菌病 |
1.1.6 猪传染性胸膜肺炎 |
1.1.7 仔猪副伤寒 |
1.1.8 猪丹毒 |
1.2 细菌耐药性概述 |
1.2.1 细菌耐药现状 |
1.2.2 细菌耐药机制 |
1.2.2.1 由细菌膜和外排泵介导的耐药 |
1.2.2.2 抗生素结构的改变 |
1.2.2.3 抗生素作用靶点改变 |
1.2.2.4 细菌状态改变 |
1.2.3 减少细菌耐药性的策略 |
1.3 细菌群体感应系统概述 |
1.3.1 群体感应系统简介 |
1.3.2 Lux S/AI-2 群体感应系统 |
1.3.3 群体感应系统与细菌生物膜 |
1.3.4 群体感应系统与细菌的环境压力应激 |
1.3.5 群体感应系统与细菌毒力 |
1.3.6 群体感应系统的受体分子 |
1.3.7 群体感应系统的临床意义 |
1.4 转录组学技术研究及应用 |
1.4.1 转录组学概述 |
1.4.2 RNA-Seq在转录组学研究中的应用 |
1.5 细菌热应激调控的分子机制 |
1.6 立题依据 |
第二章 猪场病原菌感染调查及耐药性研究 |
2.1 研究的目的与意义 |
2.2 试验材料 |
2.2.1 主要试剂 |
2.2.2 主要仪器 |
2.2.3 培养基的配置 |
2.2.4 PCR引物 |
2.2.4.1 细菌鉴定引物 |
2.2.4.2 猪链球菌分型引物 |
2.2.4.3 副猪嗜血杆菌分型引物 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 样品收集 |
2.3.2 细菌分离 |
2.3.3 PCR鉴定 |
2.3.3.1 细菌种属的PCR鉴定 |
2.3.3.2 猪链球菌和副猪嗜血杆菌的血清型鉴定 |
2.3.4 药敏试验 |
2.3.5 数据分析 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 样品来源的地区分布 |
2.4.2 样品的组织种类 |
2.4.3 病原菌的组成及分离率 |
2.4.4 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的季节性分布 |
2.4.5 猪链球菌和副猪嗜血杆菌的血清型 |
2.4.6 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的耐药性 |
2.5 讨论 |
2.5.1 样品信息分析 |
2.5.2 病原菌的流行特点分析 |
2.5.3 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的季节性感染特点 |
2.5.4 猪链球菌的副猪嗜血杆菌的血清型特征 |
2.5.5 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的耐药率比较 |
2.6 小结 |
第三章 副猪嗜血杆菌Lux S/AI-2 群体感应系统的功能研究 |
3.1 研究的目的与意义 |
3.2 试验材料 |
3.2.1 主要试剂 |
3.2.2 主要质粒、菌株和细胞 |
3.2.3 试验动物 |
3.2.4 主要仪器 |
3.2.5 培养基配置 |
3.2.6 各类PCR引物 |
3.2.6.1 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失菌株构建引物 |
3.2.6.2 HPS基因缺失互补菌株构建引物 |
3.2.6.3 HPS基因缺失菌株和互补菌株验证引物 |
3.2.6.4 其他引物 |
3.3 试验方法 |
3.3.1 luxS基因序列同源性分析 |
3.3.2 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失和互补菌株的构建及验证 |
3.3.2.1 副猪嗜血杆菌基因组提取 |
3.3.2.2 质粒小量提取 |
3.3.2.3 质粒大量提取 |
3.3.2.4 重组质粒p K18mobsacb-UKD的构建及验证 |
3.3.2.5 自然转化 |
3.3.2.6 重组质粒p SHK3-C-lux S的构建及验证 |
3.3.2.7 副猪嗜血杆菌无细胞提取物(CFEs)提取 |
3.3.2.8 CFEs体外甲基化质粒 |
3.3.2.9 电转化感受态细胞制备 |
3.3.2.10 电转化步骤与转化子鉴定 |
3.3.3 AI-1和AI-2分子的检测 |
3.3.4 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株生长曲线的测定 |
3.3.5 压力应激试验 |
3.3.6 生物膜形成试验 |
3.3.7 自身凝集试验 |
3.3.8 红细胞凝集试验 |
3.3.8.1 2%健康猪红细胞悬浮液的制备 |
3.3.8.2 血凝试验 |
3.3.9 粘附试验 |
3.3.10 半数致死量试验(LD50) |
3.3.11 小鼠组织载菌量的测定 |
3.3.12 透射电子显微镜样品准备及形态观察 |
3.3.13 统计学分析 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 luxS基因在不同菌株中的同源性 |
3.4.2 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失株和互补株的构建及验证 |
3.4.3 AI-1和AI-2分子的活性检测 |
3.4.4 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株生长曲线的测定 |
3.4.5 压力应激试验 |
3.4.6 ΔluxS菌株生物膜形成能力显着增强 |
3.4.7 ΔluxS菌株自身凝集能力显着减弱 |
3.4.8 ΔluxS菌株血凝能力显着减弱 |
3.4.9 Δlux S菌株粘附PK-15 细胞的能力减弱 |
3.4.10 ΔluxS菌株毒力显着减弱 |
3.4.11 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株的组织载菌量 |
3.4.12 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株的形态观察 |
3.5 讨论 |
3.5.1 LuxS基因序列同源性分析 |
3.5.2 luxS基因缺失和互补菌株的构建策略分析 |
3.5.3 luxS基因缺失株和互补株的生长特性比较 |
3.5.4 Lux S基因参与HPS调控环境应激 |
3.5.5 副猪嗜血杆菌群体感应系统AI-2分子的表达规律 |
3.5.6 副猪嗜血杆菌luxS基因与生物膜的关系 |
3.5.7 群体感应系统与副猪嗜血杆菌毒力 |
3.6 小结 |
第四章 副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失株转录组学及其抵抗热应激机制研究 |
4.1 研究的目的与意义 |
4.2 试验材料 |
4.2.1 主要试剂 |
4.2.2 主要仪器 |
4.2.3 实验数据分析软件 |
4.2.4 试验菌株 |
4.2.5 PCR引物 |
4.2.5.1 定量检测引物 |
4.2.5.2 副猪嗜血杆菌rse A和 rpo E基因缺失株构建引物 |
4.3 试验方法 |
4.3.1 RNA-Seq测序样品的准备 |
4.3.2 细菌RNA的提取 |
4.3.3 RNA样品中DNA的去除 |
4.3.4 反转录cDNA |
4.3.5 RNA-Seq测序与分析 |
4.3.5.1 总RNA样品检测 |
4.3.5.2 文库构建 |
4.3.5.3 库检和测序 |
4.3.5.4 生物信息分析 |
4.3.6 荧光定量PCR |
4.3.7 副猪嗜血杆菌rse A和 rpo E基因缺失株的构建及生长曲线的测定 |
4.3.8 热应激试验 |
4.3.9 统计学分析 |
4.4 结果与分析 |
4.4.1 RNA样品的质量检测 |
4.4.1.1 RNA样品的浓度测定 |
4.4.1.2 RNA样品的电泳检测 |
4.4.1.3 RNA测序样品的选择 |
4.4.2 测序数据质量评估 |
4.4.3 参考序列比对分析 |
4.4.4 基因表达水平分析 |
4.4.5 RNA-Seq样品质量评估 |
4.4.6 RNA-Seq差异表达基因 |
4.4.7 RNA-Seq差异基因GO富集 |
4.4.8 差异基因KEGG富集分析 |
4.4.9 差异基因的RT-q PCR验证 |
4.4.10 副猪嗜血杆菌rseA基因缺失株和rpoE基因缺失株的构建及验证 |
4.4.11 HPS2,Δrse A和 Δrpo E菌株的生长特性 |
4.4.12 rse A和 rpo E基因对副猪嗜血杆菌抵抗热应激的影响 |
4.4.13 副猪嗜血杆菌热应激相关调节基因的转录水平 |
4.5 讨论 |
4.5.1 转录组测序样品的准备 |
4.5.2 测序数据的处理和质量评估 |
4.5.3 基因表达水平分析 |
4.5.4 差异表达基因功能分析 |
4.5.5 差异基因富集分析 |
4.6 小结 |
第五章 受体蛋白RbsB1在副猪嗜血杆菌群体感应系统中的作用 |
5.1 研究的目的与意义 |
5.2 试验材料 |
5.2.1 主要试剂 |
5.2.2 主要质粒菌株 |
5.2.3 主要仪器 |
5.2.4 主要培养基的配置 |
5.2.5 主要PCR引物 |
5.2.5.1 HPS2 rbs B1 基因缺失株构建引物 |
5.2.5.2 PCR引物 |
5.3 试验方法 |
5.3.1 rbsB1基因序列的同源性分析 |
5.3.2 副猪嗜血杆菌rbsB1基因缺失株的构建、验证及生长曲线的测定 |
5.3.3 RbsB1蛋白的表达 |
5.3.3.1 重组质粒pet28a-rbs B1 的构建 |
5.3.3.2 RbsB1蛋白的诱导表达 |
5.3.3.3 RbsB1蛋白的纯化 |
5.3.3.4 RbsB1蛋白的检测 |
5.3.4 rbsB1基因转录水平的定量检测 |
5.3.5 AI-2分子的检测 |
5.3.6 统计学分析 |
5.4 结果与分析 |
5.4.1 rbsB1基因在不同菌株中的同源性 |
5.4.2 rbsB1基因在不同菌株中的转录水平 |
5.4.3 副猪嗜血杆菌rbsB1基因缺失株的构建及验证 |
5.4.4 HPS2和Δrbs B1 菌株生长曲线的测定 |
5.4.5 RbsB1蛋白的表达与鉴定 |
5.4.6 HPS2和Δrbs B1 菌株培养上清中AI-2 分子的表达水平 |
5.4.7 Rbs B1 蛋白与AI-2 分子的相互作用 |
5.5 讨论 |
5.5.1 rbsB1基因的同源性分析 |
5.5.2 Rbs B1 受体蛋白与群体感应系统AI-2 分子的相互作用 |
5.6 小结 |
全文总结 |
参考文献 |
附录 |
基本信息 |
致谢 |
(3)猪萎缩性鼻炎的防治技术(论文提纲范文)
1 致病原因 |
2 临床症状 |
3 治疗方法 |
3.1 初期治疗 |
3.2 抗菌消炎 |
3.3 中医疗法 |
4 防控措施 |
4.1 优化猪只饲养环境 |
4.2 严格执行检疫制度 |
4.3 做好圈舍管理工作 |
(4)猪萎缩性鼻炎的防治(论文提纲范文)
一、疾病传播途径 |
二、临床症状 |
三、诊断 |
四、治疗措施 |
五、管理控制与预防措施 |
(5)猪萎缩性鼻炎的流行特点与防治(论文提纲范文)
1 流行病学 |
2 临床症状 |
3 病理变化 |
4 防治 |
5 小结 |
(6)某集团猪场萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
本论文常用英文缩写词 |
1 前言 |
1.1 猪传染性萎缩性鼻炎的概论 |
1.2 猪萎缩性鼻炎的病原学特性 |
1.2.1 形态特征 |
1.3 AR的流行病学 |
1.3.1 易感动物 |
1.3.2 传染源及传播途径 |
1.3.3 流行特点 |
1.4 发病机理 |
1.5 临床症状 |
1.6 病理变化 |
1.7 诊断方法 |
1.7.1 临床诊断及病理诊断 |
1.7.2 细菌学诊断 |
1.7.3 免疫学方法 |
1.7.4 分子生物学检测技术 |
1.7.5 血清学诊断 |
1.8 AR的治疗与防控 |
1.8.1 AR的治疗 |
1.8.2 AR的防控 |
1.9 研究的目的和意义 |
2 材料和方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 材料的采集 |
2.1.2 试剂盒 |
2.1.3 主要实验仪器 |
2.2 方法 |
2.2.1 流行病学调查 |
2.2.2 病原菌的分离和鉴定 |
2.2.3 疫苗的安全性试验 |
2.2.4 疫苗的效果跟踪及评估 |
3 结果和分析 |
3.1 病理解剖结果 |
3.2 PCR鉴定结果 |
3.3 安全性试验结果 |
3.3.1 体温变化检测结果 |
3.3.2 免疫副反应结果 |
3.4 疫苗使用结果 |
3.4.1 产房数据结果 |
3.4.2 服务部上市肉猪数据结果 |
4 讨论 |
4.1 解剖试验讨论 |
4.2 AR经济损失评估和疫苗免疫回报的整体讨论分析 |
4.3 安全性试验讨论 |
4.4 疫苗免疫结果讨论 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
(7)猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)单克隆抗体的制备(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1 猪呼吸道疾病综合征 |
1.1 猪链球菌及其分型进展 |
1.1.1 猪链球菌 |
1.1.2 猪链球菌分型技术原理及应用 |
1.1.3 猪链球菌药敏试验进展 |
1.2 副猪嗜血杆菌及耐药性研究进展 |
1.2.1 副猪嗜血杆菌 |
1.2.2 副猪嗜血杆菌耐药性研究进展 |
1.3 猪多杀性巴氏杆菌 |
1.4 支气管败血波氏杆菌 |
1.5 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 |
1.6 研究目的与意义 |
2 猪萎缩性鼻炎 |
2.1 多杀性巴氏杆菌病原学 |
2.1.1 形态特征及培养特性 |
2.1.2 理化特征 |
2.1.3 血清型 |
2.1.4 病原蛋白 |
2.2 多杀性巴氏杆菌流行病学 |
2.3 PMT的检测 |
2.4 研究的目的与意义 |
参考文献 |
第二章 猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离和猪链球菌血清型鉴定 |
1 材料方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 病料 |
1.1.2 主要试剂 |
1.1.3 培养基的配制 |
1.2 方法 |
1.2.1 细菌的分离和鉴定 |
1.2.2 链球菌的血清分型 |
2 结果 |
2.1 细菌的革兰氏染色 |
2.2 细菌分离鉴定结果 |
2.3 猪链球菌血清分型结果 |
3 讨论 |
参考文献 |
第三章 猪呼吸道疾病综合征细菌的耐药性分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 产毒素多杀性巴氏杆菌分离、鉴定 |
1.3 药物敏感性实验 |
1.4 耐药质粒的提取及分析 |
1.5 质粒稳定性检测 |
2 结果 |
2.1 PCR检测结果 |
2.2 巴氏杆菌药敏实验 |
2.3 猪链球菌的耐药性检测结果 |
2.4 副猪嗜血杆菌的耐药性检测结果 |
2.5 质粒序列分析 |
2.6 质粒稳定检测 |
3 讨论 |
参考文献 |
第四章 多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)单克隆抗体的制备及初步鉴定 |
1 材料和方法 |
1.1 细胞、实验动物 |
1.2 主要试剂 |
1.3 免疫原的制备 |
1.4 小鼠免疫 |
1.5 间接ELISA方法测定血清抗体效价 |
1.6 细胞融合 |
1.6.1 SP2/0骨髓瘤细胞的准备 |
1.6.2 饲养细胞的准备 |
1.6.3 免疫脾细胞的制备 |
1.6.4 细胞融合 |
1.6.5 阳性杂交瘤细胞株的筛选与亚克隆 |
1.7 单克隆抗体的鉴定 |
1.7.1 单克隆抗体的特异性鉴定 |
1.7.2 单克隆抗体细胞株的稳定性试验 |
1.7.3 单抗Ig亚型鉴定 |
1.7.4 单抗抗原位点分析 |
2 结果 |
2.1 抗原蛋白的表达及纯化 |
2.2 杂交瘤细胞株的筛选及克隆化培养结果 |
2.3 单抗的特异性鉴定 |
2.4 单抗的Ig亚型鉴定 |
2.5 杂交瘤细胞株的分泌稳定性 |
2.6 单抗的抗原位点分析 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文总结 |
致谢 |
(8)猪萎缩性鼻炎的综合防控措施(论文提纲范文)
1 病因 |
2 传播途径及症状 |
3 临床诊断 |
4 防控措施 |
4.1 引种 |
4.2 饲养管理 |
4.3 严格免疫 |
4.4 药物预防与治疗 |
(9)猪萎缩性鼻炎综合防控措施(论文提纲范文)
1. 不从疫区引种。 |
2. 应加强对猪群的饲养管理。 |
3. 制定严格而规范的免疫程序。 |
4. 做好预防性使用药物的防控措施。 |
5. 治疗方法。 |
(10)猪传染性萎缩性鼻炎(AR)的防治(论文提纲范文)
(一) 猪萎缩性鼻炎 (AR) 的临床表现 |
(二) 正确认识猪萎缩性鼻炎 (AR) 的危害 |
(三) 如何确知猪群中萎缩性鼻炎的感染程度 |
四、注意防治猪萎缩性鼻炎(论文参考文献)
- [1]猪萎缩性鼻炎有效性防控措施[J]. 常海波. 今日畜牧兽医, 2022(02)
- [2]副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究[D]. 张丙周. 华中农业大学, 2020(02)
- [3]猪萎缩性鼻炎的防治技术[J]. 马宝刚. 中国动物保健, 2020(03)
- [4]猪萎缩性鼻炎的防治[J]. 赵思远. 兽医导刊, 2019(01)
- [5]猪萎缩性鼻炎的流行特点与防治[J]. 顾宝勇,钱明诗,封士军. 畜牧兽医科技信息, 2018(10)
- [6]某集团猪场萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控研究[D]. 叶延瑞. 华南农业大学, 2018(08)
- [7]猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)单克隆抗体的制备[D]. 王美芬. 南京农业大学, 2018(07)
- [8]猪萎缩性鼻炎的综合防控措施[J]. 夏道伦. 饲料博览, 2016(09)
- [9]猪萎缩性鼻炎综合防控措施[J]. 夏道伦. 农村新技术, 2016(09)
- [10]猪传染性萎缩性鼻炎(AR)的防治[J]. 张善超,张辉. 猪业观察, 2015(05)