一、组织的HE整块染色改良法（论文文献综述）
谢希哲[1]（2021）在《可生物降解的缓释型免疫水凝胶制备及其在三阴性乳腺癌治疗中的应用》文中研究说明三阴性乳腺癌是一种预后较差且容易转移至脑、肺或骨骼的实体肿瘤,临床上亟需开发长效释药技术来抑制其生长和转移。近年来,肿瘤免疫治疗研究进展突飞猛进,在临床上取得了较理想的治疗效果,因此受到广泛关注。Toll样受体（Toll Like Receptor,TLR）7/8激动剂由于其强效的抗肿瘤活性以及逆转肿瘤免疫抑制微环境的能力,引起科研人员的极大关注。雷西莫特（Resiquimod,R848）是一种能同时激活天然免疫和获得性免疫反应的TLR7/8激动剂,在肿瘤免疫治疗方面具有极大的潜力。然而,R848的剂型多为溶液制剂,患者对其治疗的响应率不高且在治疗过程中常会伴随全身性副作用。为了使R848可以在病灶部位长时间达到有效浓度,建立持续性抗肿瘤微环境,开发一种具有良好生物相容性的长效缓释系统具有重大价值。因此,本文设计制备了一种可原位长效缓释R848的微球（Ms）-水凝胶（Gel）复合载体R848@Ms-Gel,拟通过实现肿瘤的持久治疗并培养肿瘤免疫微环境来实现对原发肿瘤生长的抑制并防止肿瘤的转移。（1）载R848聚乳酸-羟基乙酸微球（R848@Ms）的制备及表征将R848与聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）混合溶于二氯甲烷,滴入高速搅拌的聚乙烯醇（PVA-124）中,通过乳化作用形成R848@Ms。光学显微镜以及扫描电子显微镜（SEM）观察R848@Ms形态,结果显示其呈球形且分布均匀,粒径约为44.6μm,用高效液相色谱（HPLC）测定其载药量和包封率分别为1.65%和75.90%。（2）载R848@Ms-水凝胶（R848@Ms-Gel）的制备和表征以四臂聚乙二醇丙烯酸酯（4-arm PEG-AA）为基体材料与交联剂二硫苏糖醇（DTT）反应,由前者的双键与后者的巯基结合形成致密的水凝胶网络结构。将载药微球与水凝胶前液混合,在光引发剂和紫外光催化下形成载药微球-水凝胶（R848@Ms-Gel）。用流变仪进行流变测试对水凝胶性状进行分析。在体外模拟体液环境,进行水凝胶降解行为和R848释放行为的研究。结果显示,水凝胶基体材料降解周期约为2-3周,R848@Ms-Gel稳定持续释放周期约为2-3周。通过小动物成像发现制备的缓释制剂能够在原位缓释药物达到20天左右。细胞毒性实验以及活死细胞染色实验的结果显示R848@Ms-Gel对细胞无毒性,体现出了其良好的生物相容性。（3）R848@Ms-Gel对原发肿瘤和转移瘤的抗肿瘤疗效评价利用4T1三阴性乳腺癌细胞建立Bal b/c小鼠皮下肿瘤模型用于体内治疗,在种瘤后七天左右,瘤旁皮下注射PBS、游离R848和R848@Ms-Gel。经过不同处理后,于不同时间点对小鼠进行眼球取血检测小鼠血清中各类免疫因子的含量,发现R848@Ms-Gel组可以上调IL-6、IL-12和IFN-γ等免疫因子。持续观察小鼠体重、肿瘤生长情况,发现R848@Ms-Gel组与对照组相比具有较好的抗肿瘤作用。此外,利用4T1细胞构建肺转移模型,发现R848@Ms-Gel组对肿瘤细胞对于肺的侵袭有较好的抑制作用。综上所述,本文所合成R848@Ms-Gel免疫水凝胶具有良好的原位长效缓释功能及生物相容性,并且具有良好的抑癌能力,为三阴性乳腺癌的免疫治疗开辟了一个新的思路。
郭靖琳[2]（2020）在《三维与二维光学成像在胶质母细胞瘤空间异质性研究中的比较与应用研究》文中研究指明胶质瘤（Glioma）是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤,占成人中枢神经系统恶性肿瘤80%以上。其中胶质母细胞瘤（Glioblastoma Multiform,GBM）最为常见,恶性程度最高。GBM具有分化差,细胞多形性,核异型性,活跃的有丝分裂象,微血管肾小球样增生以及假栅栏样坏死等病理特征。目前临床上GBM的公认治疗手段为最大安全范围内手术切除肿瘤,同时结合放疗、化疗。但是GBM患者的预后不容乐观。随着对GBM认识加深,GBM的异质性被认为是各种全面治疗抵抗以及预后不良的关键原因。然而传统的组织切片,采用苏木素-伊红染色、免疫组织化学和免疫荧光等二维（2D）的分析方法难以全面体现GBM空间异质性。近年研发出来的利用化学试剂使器官或大块生物组织透明,光学仪器直接进行观察的透明化-三维（3D）成像技术在神经网络研究中得到广泛运用。本研究通过从细胞形态、细胞分布特征、组织结构、GBM细胞空间分布异质性四个方面对透明化-3D成像技术与2D图像成像技术的图像信息呈现特点进行比较。第一章光学组织透明化技术适用于正常脑组织与GBM组织方法:应用CUBIC和iDISCO+光学组织透明化技术分别对正常大鼠脑和人类GBM及正常脑组织处理,并使用DAPI进行细胞核染色,通过使用多光子显微镜对深部组织成像,评估透明化3D成像效果。结果:应用CUBIC和iDISCO+光学组织透明化技术分别处理大鼠脑组织和GBM组织后,观察到组织透亮,光线未发生明显扭曲,多光子显微镜从不同角度,不同深度清晰详细人类GBM及正常脑组织成像。第二章2D与3D成像方式在脑组织与GBM组织中的比较方法:应用IHC、IF技术在组织石蜡包埋切片、GBM原代细胞培养进行标记染色,显微镜成像;应用光学组织透明化技术对脑组织透明化,进行标记染色,多光子显微镜3D成像。结果:细胞形态、分布以及大体空间结构三方面对比发现在2D技术图像中阳性结果清晰可靠却未能整体三维观察,缺乏立体形态信息;光学组织透明化3D成像可以从不同角度、不同深度、不同层面定性、定量及整体观察细胞形态、分布,此外还清晰展示了脑组织中髓鞘与血管的走行,展现出了 3D成像反映组织细节空间建构的优势。第三章3D成像方法为GBM提供了精确的空间异质性信息方法:应用光学组织透明化技术、IF技术分别处理GBM组织,细胞干性标记,星形胶质细胞分化标记,血管标记,免疫细胞标记荧光染色,应用多光子显微镜、荧光显微镜分别成像分析。结果:GBM组织中不同深度层面肿瘤细胞的干性、分化程度、微血管及免疫细胞细胞密度不均匀分布。总的来说2D成像方法准确展示出了细胞的平面形态和蛋白表达定位,3D成像方法在跨越大尺度空间的细胞立体形态、分布以及组织大型结构时展现了显着优势。此外,联合运用2D和3D的成像分析方法进一步发挥优势认识了 GBM细胞的空间异质性。
王香溢[3]（2020）在《氯化琥珀胆碱中毒大鼠给药点皮肤处药物含量的UHPLC-HRMS法测定及靶器官损伤的形态学变化》文中指出氯化琥珀胆碱（suxamethonium chloride）又称司可林、氯琥珀胆碱、氯化琥珀酰胆碱,化学名为二氯化2,2-[（1,4-二氧-1,4-亚丁基）双（氧）]双[N,N,N-三甲基乙胺]二水合物,分子式为C14H30Cl2N2O4·2H2O。其属于去极化类肌肉松弛药,临床用作全身麻醉时的肌肉松弛剂,可引起心动过缓、心律失常、心搏骤停等不良反应,若超量注射该药或不配合使用呼吸机的话,可致人支气管痉挛或过敏性休克死亡,属于B级有机剧毒品,近年来氯化琥珀胆碱被不法分子应用于飞镖射杀家禽、家畜类动物,更有甚者,氯化琥珀胆碱被犯罪分子用作杀人工具的案例屡见报道,根据文献记载,安徽、浙江、广东等地是此类案件的高发区。氯化琥珀胆碱的法医学检验从而成为当今司法实践中的一个新问题。由于氯化琥珀胆碱在体内快速分解成琥珀酸和胆碱,约2%以原形,其余以代谢物的形式从尿液中排出,而这两种分解物在体内本身就是存在的,这给氯化琥珀胆碱的体内检测又增加了难度。因此寻求氯化琥珀胆碱中毒后的法医病理学及理化特征,为氯化琥珀胆碱中毒案件定性提供科学的参考执行标准和依据。目的:1.观察皮下注射氯化琥珀胆碱（SUC）致大鼠相关器官或组织的病理变化。2.UHPLC-HRMS法测定注射点皮肤中SUC的含量并建立其方法学,UPLC-MS/MS法大鼠肾脏组织中2H-SUC的方法学验证。方法:1.大鼠皮下注射SUC,光镜下观察肌肉、心、肾、肺及气管等组织的病理学变化;电镜下观察肌肉、肾、注射点皮肤等组织的病理学变化。2.用超高压液相色谱串联高分辨率质谱仪（UHPLC-HRMS）法测定大鼠注射点处皮肤SUC含量,色谱采用Luna NH2色谱柱（2 mm×100 mm,,3μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈等度洗脱,流速是0.2 ml/min,进样体积是10μl,柱温37℃,进样时间为5 min。质谱测定采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法、可加热的电喷雾离子源（HESI）及正离子扫描模式。3.用UPLC-MS/MS法测定肾脏中2H-SUC的方法学验证;色谱采用Luna NH2色谱柱（2 mm×100 mm,3μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈等度洗脱,流速为0.2 ml/min;正离子扫描模式,多反应监测模式下,电喷雾离子化源进行检测;考察该方法的线性关系与检测限、准确度和精密度、回收率、基质效应和稳定性。结果:1.SUC 1.5、3.0和6.0 mg/kg可致大鼠肌肉、心、肾及肺等组织发生了明显的病理学组织学损伤;Mallory磷钨酸组织化学染色法显示SUC可引起大鼠心肌纤维维疏松、间隙增大,免疫组织化学法检测了中毒大鼠肌肉、心、肾、肺及支气管等组织中CD3、CD20、CD31、CD56和神经分泌颗粒膜蛋白等蛋白表达情况,仅发现SUC可增加大鼠肾间质中CD3的表达,电子显微镜观察到SUC可引起肾细胞中线粒体及骨骼肌细胞中肌节和肌丝的损伤。2.紫外全波长扫描在SUC标准品溶液、加SUC大鼠血清及皮下注射SUC大鼠血清中均未观察到特定的吸收峰;通过UHPLC-HRMS法,在大鼠注射点处皮肤中检测到了SUC,其含量随剂量增加而加大。SUC在0.2-10 ng/ml线性范围良好,回收率为80.55%～90.44%,相对标准偏差均小于15%,精密度和准确度均符合要求。3.通过UPLC-MS/MS法,肾组织中2H-SUC在0.5～100 ng/m L线性范围良好,日内、日间精密度和准确度均小于15%,回收率在85.30%～96.76%之间,经过处理后的样品不存在明显的基质效应。结论:1.SUC皮下注射可致大鼠心、肾、肺及肌肉组织发生明显的病理组织学损伤。2.UHPLC-HRMS法可测定其注射点处皮肤中的SUC,并建立大鼠皮肤中氯化琥珀胆碱的方法学。3.UPLC-MS/MS法可测定肾组织中2H-SUC,并建立肾组织中氘代氯化琥珀胆碱的方法学。
金瑞美[4]（2019）在《基于基因工程多肽的可注射杂化水凝胶的制备及其在肿瘤治疗中的应用》文中指出癌症是当今严重威胁着人类的健康和生命的疾病之一。传统的癌症治疗方式包括手术切除、放疗和化疗等。然而,由于肿瘤转移复发率高,传统肿瘤治疗方式毒副作用大,导致肿瘤治疗仍然处于较低水平。为了提高肿瘤治疗效果,许多研究者尝试将化疗、光热治疗（PTT）、光动力治疗（PDT）、免疫治疗等联合的多模态治疗手段用于肿瘤治疗,并取得了一定的效果。然而,把不同的功能性纳米颗粒集中到一个治疗体系上,面临巨大的挑战,诸如复合纳米颗粒不便于化学修饰、合成方法复杂等。原位可注射性水凝胶由于其无创伤性、操作简便、易于包裹纳米颗粒和肿瘤化疗药物、能够填充复杂的缺损组织空腔等优点,在生物医学领域引起了广泛的关注。基因工程多肽是基于基因剪切技术和基因重组技术,通过在DNA分子水平上调控基因序列,利用改造的工程细菌大量合成出的多肽。基因工程多肽具有便于引入特定酶切位点和功能化目的基因片段的特点。由基因工程多肽制备的可注射性基因工程多肽水凝胶,具有结构灵活可控、成分单一、功能多样、生物相容性好等优势。基于此,本论文利用基因工程多肽制备了多种功能化的可注射性水凝胶,并通过体外细胞实验和小鼠在体实验评估了其在肿瘤治疗中的应用,主要研究结果如下:（1）设计并合成了一种基于基因工程多肽PC10A的可注射性PC10A/PTX/DOX纳米水凝胶。利用超声处理把疏水性化疗药物紫杉醇（PTX）装载到PC10A纳米水凝胶的疏水空腔,通过静电吸附作用装载亲水性化疗药物阿霉素（DOX）制备可注射性PC10A/PTX/DOX纳米水凝胶。PC10A/PTX/DOX纳米水凝胶对HeLa细胞的治疗表现出明显的药物协同效果,协同指数达到0.953。体外和体内抗肿瘤治疗实验均表明PC10A/PTX/DOX纳米水凝胶能有效抑制HeLa肿瘤的生长。因此,该设计为同时装载憎水性和亲水性药物提供了一种新的方法。（2）通过将DOX和PC10A逐层吸附到HAuNS纳米颗粒上制备PC10A/DOX/HAuNS纳米颗粒。将PC10A/DOX/HAuNS纳米颗粒“溶解”于PC10A水凝胶中,制备同时具有光热和化疗功效的可注射PC10A/DOX/HAuNS水凝胶。通过DOX从PC10A水凝胶中和HAuNS中释放时间的不同实现化疗药物的顺序释放。活体抗肿瘤实验结果表明,PC10A/DOX/HAuNS水凝胶联合光热治疗与化疗对HepG2肿瘤具有良好的抑制作用。（3）制备了一种基于工程多肽PC10A、硫化银量子点（Ag2S QD）和化疗药物PTX的PC10A/Ag2S QD/PTX多功能可注射性水凝胶。实验结果显示,肿瘤内Ag2S QD光声信号、荧光信号强度的变化与水凝胶的降解和药物释放趋势基本一致。Ag2S QD在活体肿瘤内荧光成像时间长达30天左右,可以实现对肿瘤内水凝胶的降解进行长时间监测。体外细胞治疗和活体抗肿瘤治疗实验结果均证明PC10A/Ag2S QD/PTX水凝胶结合化疗和光热疗能够明显增强肿瘤治疗效果。PC10A/Ag2S QD/PTX水凝胶在结合化疗和热疗的同时,通过光声成像和荧光成像能长时程在体监控水凝胶的降解和药物的释放。（4）设计并制备了一种联合PDT、PTT、化疗和免疫治疗多模式治疗于一体的可注射性PC10A/DOX/MoS2水凝胶,用于小鼠4T1乳腺癌治疗。其中2D MoS2能同时作为光热治疗剂和光动力治疗剂。经过PDT、PTT和化疗联合治疗的小鼠,生存比例提高至80%。治疗组小鼠肿瘤和淋巴结中成熟的树突状细胞比例以及血液中免疫因子IL-6和肿瘤坏死TNF-α的分泌水平明显提高;CD4+T细胞和CD8+T细胞数量也显着增多,表明基于2D MoS2纳米片的光动力治疗和光热治疗可以诱导抗肿瘤免疫应答。因此,PC10A/DOX/MoS2水凝胶有望用于光动力治疗、光热治疗、化疗和免疫疗法联合治疗4T1乳腺癌肿瘤,为恶性肿瘤的治疗提供新的策略。本论文主要致力于研究多功能可注射水凝胶的制备及其在肿瘤治疗方面的应用。通过在水凝胶中掺杂多种化疗药物和功能性纳米颗粒,联合化疗、光热治疗、光动力治疗和免疫治疗等多种治疗模式,并利用近红外荧光成像、光声成像等生物成像方式监控水凝胶的降解和药物的释放,有望为多模态生物成像监控水凝胶的降解和多模态肿瘤治疗提供新的思路和方法。
赵金龙[5]（2019）在《DHEA对小鼠抵抗大肠杆菌O157:H7感染的影响及其机制研究》文中认为大肠杆菌O157:H7（E.coli O157:H7）在自然界广泛存在。随着畜禽集约化养殖模式的不断发展,畜禽感染E.coli O157:H7非常普遍,这给畜禽养殖业带来了较大的经济损失。大肠杆菌多宿主、多途径传播等一些特点,导致E.coli O157:H7感染已成为一个全球性的公共卫生问题。脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）作为机体血液循环中含量最丰富的类固醇物质,因其独特的生物学功能而被认为是具有多向性的“激素缓冲剂”。目前,对DHEA生物学功能的研究主要集中于其对机体代谢、中枢神经系统、氧化应激等方面,有关DHEA对细菌感染的动物免疫机能的影响及其相关机制方面的研究报道甚少。因而,本试验选用小鼠作为研究对象,在探讨DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠免疫功能的调节作用之上,通过体外阐明DHEA对E.coli O157:H7感染的原代腹腔巨噬细胞炎症反应的缓解效应及其机制;研究旨在揭示DHEA对小鼠抵抗细菌感染、缓解炎症的确切作用及相关通路间的“对话”关系。研究结果将为揭示DHEA对机体免疫功能的影响提供重要的理论依据,同时对保障畜禽和人类健康具有一定的指导性意义。1 DHEA对小鼠抵抗E.coli O157:H7感染的研究本实验以ICR小鼠为研究对象,在建立E.coli O157:H7感染小鼠模型基础之上,探讨DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠存活情况、免疫指数、组织病理学变化等方面的影响,以期揭示DHEA对小鼠抗E.coli O157:H7感染能力的影响。小鼠腹腔注射E.coli O157:H7探讨小鼠对E.coli O157:H7的耐受性,以便确定E.coli O157:H7对小鼠的半数致死量。小鼠灌胃3周不同浓度的DHEA后腹腔注射LD50的E.coli O157:H7,一周后采集血清、脾脏、小肠等组织,待测。利用稀释涂布平板法测定小鼠腹腔液细菌浓度;HE染色观察小鼠小肠组织病理学变化;试剂盒检测乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性。结果表明,E.coli O157:H7对小鼠的LD50为2.3×108CFU。LD50的E.coli O157:H7感染导致小鼠小肠组织出现肠绒毛断裂、脱落、出血等病理学变化,而DHEA处理能够降低E.coli O157:H7感染所致的损伤、提高小鼠成活率,并呈现出明显的剂量依赖性。此外,2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理可显着提高小鼠脾脏免疫指数、脾脏中乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性,并显着降低小鼠腹腔液细菌浓度（P<0.05）。以上结果提示,DHEA处理可调节脾脏免疫功能、清除感染细菌,提高小鼠的成活率。2 DHEA对小鼠抵抗E.coli O157:H7感染作用的机制研究本试验以E.coli O157:H7感染的小鼠为研究对象,探讨DHEA对炎症介质和细胞因子产生的影响及其可能的信号转导机制,旨在揭示DHEA抵抗E.coli O157:H7感染生物化学机制。小鼠灌胃DHEA并用LD50的E.coli O157:H7感染,试验结束后采样、待测。试剂盒检测脾脏和血清中iNOS活性和NO含量;Real-time PCR法检测脾脏细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、IL-4和IL-10 mRNA表达水平;酶联免疫吸附法测定脾脏和血清中IFN-γ和IL-4含量;Western blot法检测脾脏MAPK和NF-κB蛋白表达水平。结果表明,0.2 mg/kg DHEA处理可显着降低血清中iNOS活性（P<0.05）,2 mg/kg DHEA处理可显着降低血清中NO含量（P<0.05）。2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理均可显着降低脾脏中iNOS活性（P<0.01）以及TNF-α、IL-1β和IFN-γmRNA表达水平（P<0.05）;4 mg/kg DHEA处理可显着降低脾脏IL-6mRNA表达水平（P<0.05）。2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理可显着升高脾脏IL-4 mRNA表达水平（P<0.05）,4 mg/kg DHEA处理可显着升高脾脏IL-10 mRNA表达水平（P<0.05）。2 mg/kg DHEA处理可极显着降低脾脏IFN-γ含量（P<0.01）,而2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理可显着升高血清IL-4含量（P<0.05）。此外,2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理均可显着降低脾脏中p-p38 MAPK蛋白表达水平（P<0.05）,而对p-ERK1/2和p-JNK1/2蛋白水平没有显着性影响（P>0.05）;2 mg/kg和4 mg/kg DHEA处理均可极显着降低p-IκB-α和细胞核内NF-κB蛋白水平,升高胞质中IκB-α和NF-κB蛋白水平（P<0.01）。以上结果提示,DHEA可降低炎性介质和促炎因子的表达、促进抗炎因子的表达而缓解E.coli O157:H7诱发的炎性反应,且这种效应可能是通过抑制p38 MAPK和NF-κB的表达而实现的。3 DHEA调节小鼠原代腹腔巨噬细胞抗E.coli O157:H7感染的作用及其机制研究本试验以ICR小鼠原代腹腔巨噬细胞为研究对象,探讨DHEA对E.coli O157:H7引起的炎症反应的调节作用及其信号转导机制。试验首先分析E coli O157:H7对小鼠原代腹腔巨噬细胞损伤的时间效应,以确定DHEA的处理浓度和E.coli O157:H7作用时间。稀释涂布平板法检测小鼠原代腹腔巨噬细胞的吞噬能力;酶联免疫吸附法测定细胞培养液中 TNF-α、IL-1β 和 IL-6 含量;Western blot 法分析 iNOS、COX-2、p38 MAPK和NF-κB蛋白表达水平。结果表明,100 μmol·L-1的DHEA显着降低小鼠原代腹腔巨噬细胞活力（P<0.05）。E.coli O157:H7感染细胞3 h时产生显着性损伤,且一定浓度的DHEA预处理可显着缓解E.coli O157:H7诱发的损伤（P<0.05）;但当E.coli O157:H7感染细胞4 h时产生DHEA处理无法缓解的严重损伤。不同浓度的DHEA处理对细胞的吞噬能力没有显着影响（P>0.05）。0.1μmol·L-1 DHEA处理极显着降低细胞培养液中TNF-α和IL-1β的含量（P<0.01）,而0.1 μmol·L-1和1 μmol·L-1 DHEA均能显着降低细胞培养液中IL-6的含量（P<0.05）。0.1μmol·L-1和10 μmol·L-1 DHEA处理均能显着降低细胞iNOS和COX-2蛋白水平（P<0.05）。0.1 μmol·L-1和10 μmol·L-1 DHEA具有与SB203580（p38 MAPK特异性抑制剂）相似的生物学作用,其均可显着降低p-p38 MAPK蛋白水平、显着升高IκB-α蛋白水平（P<0.05）;0.1μmol·L-1-10 μmol·L-1 DHEA均能显着降低p-IκB-α和细胞核中NF-κB蛋白水平,并显着抑制细胞质中NF-κB的减少（P<0.05）。以上结果提示,DHEA通过下调p38 MAPK和NF-κB活化而降低E.coli O157:H7诱导的小鼠原代腹腔巨噬细胞炎性因子的过度产生,最终表现为缓解炎症的发展。结果提示,DHEA可提高E.coli O157:H7感染小鼠脾指数、降低腹腔菌体浓度、减轻小肠组织的病理损伤,整体上表现为提高E.coli O157:H7感染小鼠的成活率。DHEA可降低iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性介质的过度产生,同时促进抗炎因子IL-4和IL-10的分泌,从而缓解E.coli O157:H7感染导致的炎症损伤。DHEA通过抑制p38 MAPK蛋白活化而阻断NF-κB的活化入核,进而调节炎性因子的表达以缓解过度的炎症反应,最终实现对E.coli O157:H7感染小鼠的保护效应。
曹俊,李运红,姚玉玲,贺奇彬,吴寒,邹晓平[6]（2015）在《十二指肠乳头腺瘤内镜下乳头改良切除术的临床研究》文中研究指明目的评估改良的内镜下乳头切除法在十二指肠乳头腺瘤切除术的可行性及优势。方法收集鼓楼医院消化内科从2007年10月至2012年12月经内镜超声、管腔内超声和胃镜活检病理证实的56例十二指肠乳头腺瘤患者或未侵犯胰胆管系统的原位癌。腺瘤直径大小从0.35.0 cm,24例患者采取常规乳头腺瘤切除术,32例患者采用改良的内镜下黏膜切除术,术后行ERCP并选择放置胰胆管支架。结果改良组整块切除率87.5%（28/32）,常规组整块切除率为60.9%（14/23）,差异有统计学意义（P<0.05）,改良组的完全切除率为93.8%（30/32）,常规组的完全切除率87.0%（20/23）,差异无统计学意义（P>0.05）。2组对术后胰胆管支架置入数量及难易程度比较,差异无统计学意义（P>0.05）;改良组和传统组的近期并发症发生率为15.6%（5/32）和41.6%（10/24.）,差异有统计学意义（P<0.05）;2组远期并发症发生率差异无统计学意义。改良组复发率为7.1%（2/28）,常规组复发率15.0%（3/20）,差异无统计学意义（P>0.05）。结论内镜乳头切除改良法可以提高十二指肠乳头腺瘤内镜治疗效果。
蒙兆年[7]（2014）在《整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究》文中研究说明传统石蜡组织切片片染制作法有一些弊端和局限性,如每次制作的数量少、制作周期长、耗费制作者较多的时间和精力,不适宜大批量教学切片制作需要。整块组织H.E染色切片制作法是近年来新出现的一种制片方法。本论文通过实验,利用自行配制的染液,即苏木素染色剂15mg、蒸馏水40mL、钾明矾600mg、碘酸钠5mg配制成苏木素染液；伊红染液用伊红R或B250mg、95%酒精50mL、蒸馏水50mL、冰醋酸少许配制成伊红染液,然后经过固定、浸洗、染苏木素液、浸洗分色、蓝化、梯度浓度酒精脱水、染复制伊红、盐酸酒精分色、纯酒精脱水、二甲苯透明、石蜡组织包埋、切片等一系列过程制作切片。此法制成的切片染色效果更加均匀,色彩更加亮丽。通过实验发现整块组织制作的切片染色效果在有些方面要优于传统制作法,且在制作程序上大大简化,可以为制作者节省大量的时间及精力,对大批量教学科研石蜡组织切片的制作较为适宜,适合于大批量平行制作。论文同时对两种制作方法的发展演化、各自在制作过程中的适应性和各自利弊点开展了较为深入的探讨。
张家禾,周作红,左伟勇,洪伟鸣,张苏倩,张晖[8]（2014）在《长白猪肝脏、肾脏和淋巴结的显微形态及糖原PAS反应研究》文中提出[目的]对商品长白猪的组织形态学进行研究,了解商品长白猪宰前的生理状态。[方法]采集长白猪的肝脏、肾脏和淋巴结3种组织器官并制成石蜡切片,采用H.E染色方法对其组织结构进行研究。[结果]肾脏和肝脏的组织结构形态正常,肾脏和肝脏的细胞核染色明显,淋巴结的皮质和髓质分界不清晰,周围组织没有明显的淋巴索,淋巴窦较小。糖原PAS染色结果表明肝脏中的糖原颗粒较少,分布不均匀,而肾脏中糖原或糖蛋白多集中于血管球和肾小囊壁上。[结论]该研究可为今后进一步的商品长白猪理论研究奠定基础。
郭喆[9]（2008）在《Aβ蛋白PET显像用于AD诊断和疗效监测的实验研究》文中进行了进一步梳理目的1研究Aβ蛋白特异性显像剂:合成11C-PIB及新型显像剂4’-Schiff-O[11C]CH3测定显像剂的生物学分布以及在体与Aβ蛋白的亲和力。2研究两种Aβ蛋白特异性显像剂的临床PET显像特点:分析AD患者及MCI患者的PET显像特点及临床应用价值。3研究PET成像技术评价AD大鼠疗效的可行性:PET监测中药FZS治疗自然老化AD大鼠的疗效。方法1测量Aβ蛋白特异性显像剂在体内的生物学分布,在体PET显像观察模型大鼠脑内Aβ蛋白分布并与病理学结果进行对照。2 11C-PIB PET连续动态显像,严格筛选3组受试者,阿尔茨海默病（AD）患者组6例,轻度认知功能障碍（MCI）组8例,健康对照（HC）组7例。两名核医学医师视觉分析各组受试者的图像,总结成像特点。感兴趣方法（ROI）划取大脑皮层各叶和皮层下核团,得出各个脑区不同时间点的SUV值。并选取5min,45min两个时间点的SUV值,计算出5～45min的放射性清除率和45min时间点的各脑区与小脑的SUV比值。将计算得到的三组的清除率和脑区/小脑比值进行统计学分析。进行4’-Schiff-O[11C]CH3 PET显像的初步临床显像。3老年模型大鼠采用中药复智散（FZS）治疗三十天后,分别行18F-FDG、11C-PIB显像,以及HE染色、Aβ蛋白免疫荧光、Brdu免疫荧光和NeuN免疫荧光。结果1两种放射性药物在动物脑内的摄取高,清除快。Aβ1-40注射大鼠海马区出现神经元减少及淀粉样斑块的形成,Aβ蛋白特异性显像剂的摄取增加。2 11C-PIB能快速通过血脑屏障,且之后能很快从健康脑组织内洗脱。AD患者脑内放射性清除较HC减慢。MCI组中一部分受试者PET图像特点与HC组相似;脑内放射性清除较快,而另外一部分受试者的脑内放射性清除则较慢。AD患者组大脑皮层及皮层下核团放射性清除与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,而白质及小脑差异无统计学意义。脑区/小脑比值AD与HC比较,除脑桥/小脑及白质/小脑外其余脑区与小脑的比值两组之间差异均具有统计学意义（P＜0.05）。将MCI按照显像结果分为两组（AD类似组及HC类似组）进行统计分析。3 AD类似组与AD组之间的清除率及脑区/小脑比值相比差异无统计学意义,而AD类似组与HC组之间的结果比较类似于AD组与HC组的比较结果。HC类似组与HC组之间的清除率及脑区/小脑比值相比差异无统计学意义,而HC类似组与AD组之间的结果比较则类似于HC组与AD组的比较结果。4 4’-Schiff-O[11C]CH3在AD脑内的放射性摄取较高,而清除较健康老年人减慢。5 PET显像观察老年组大鼠治疗前后的脑内淀粉样物质的分布及葡萄糖代谢情况,治疗后的模型大鼠葡萄糖代谢有改善,而淀粉样物质的显像未见明显好转,该结果与病理结果一致。结论1 11C-PIB及4’-Schiff-O[11C]CH3符合神经系统显像剂的要求,在体可与Aβ蛋白特异性结合。2 Aβ蛋白PET显像可成为一种有效诊断AD的神经影像学工具,且11C-PIB PET显像有可能成为判断MCI预后的一种方法。2 PET显像可作为评价AD动物模型的一种手段,而且中药FZS可通过增加神经细胞的增殖和存活而改善老年大鼠的记忆功能。
于大志[10]（2007）在《临床常用肌瓣及小腿肌肉的神经支配及相关研究》文中指出[目的]①观察并测量临床常用肌瓣,即足拇展肌、背阔肌、股薄肌、胸小肌、腹直肌和缝匠肌,及小腿各肌肉的形态和肌肉起止点。明确支配各肌肉的神经来源、肌外神经走行,测定各神经分支的入肌点。观察肌肉解剖肌亚部的划分。②通过Sihler’s肌内神经染色,观察神经入肌后的走行、分布及神经肌亚部的划分。③根据大体解剖及肌内神经染色的结果对肌肉进行综合分类。④探讨临床常用肌瓣及小腿诸肌能否被分割为若干个肌亚部,填补解剖学的空白,为临床切取部分肌肉用于移植和指导手术入路提供解剖学依据。[方法]1大体解剖学研究:解剖15侧经10%甲醛固定的成年尸体小腿及8侧成年尸体的临床常用肌瓣,观测肌肉的形态和肌束排列走行方向;研究支配肌肉的神经来源及走行,记录肌外神经分支。以腓骨头水平为基准测定肌肉起点和各神经分支的入肌点,将肌肉做矢状切和水平切,观察肌肉内部肌束的排列和肌内腱板走行情况。2肌内神经染色:切取新鲜成年尸体的92块小腿肌和24块临床常用肌瓣共116块骨骼肌。采用Sihler’s肌内神经染色方法,经过取材、固定、浸软、除色素、脱钙、染色、脱色、中和以及透明等一系列过程,达到透明肌肉,着色神经的目的,观察神经在肌内的走行及分布。3肌肉分类的方法:根据Lim等人对上肢肌的分类方法,再结合本实验大体解剖和肌内神经染色的结果,对本实验中的肌肉进行分类,提出肌肉的亚部化观点。[结果]1大体解剖学结果剖肌亚部划分,这些肌肉包括扁肌（腘肌、胸小肌、背阔肌）、双羽肌（腓骨长肌、比目鱼肌、部分趾长屈肌）、多头肌（腓肠肌）、环羽肌（胫骨前肌、胫骨后肌）和多腹肌（腹直肌）。2肌内神经染色结果Sihler’s染色后,肌肉呈透明或半透明状,外形完整,肌束的走行方向肉眼可见,肌肉内的神经各级分支被染成紫蓝色,在肌肉内的分支及走行清晰可见。最适合临床上进行亚部移植的小腿肌肉有腓肠肌、比目鱼肌、胫骨前肌、胫骨后肌和腓骨长肌。临床常用肌瓣的神经亚部划分:①足拇展肌可以分为前中后三个亚部;②背阔肌可以按肌纤维走行方向将其分为3～4个亚部;③股薄肌可以分为上中下三个亚部;④腹直肌可以取其中一个节段作为移植供体,也可以纵行劈开一个或者几个节段进行移植;⑤胸小肌可以将其分为上下两个肌亚部;⑥缝匠肌可以取下亚部的内侧或者外侧次亚部进行移植。3肌肉综合分类结果4肌内神经分布规律①当神经在肌肉的起点入肌,且方向与肌肉长轴平行时,神经将沿肌肉方向向前延伸,分支呈平行或放射状排列（如拇长伸肌、背阔肌）。当肌肉被肌内腱膜延伸分成几部分时,神经分支也将分为几组,分别支配被分割的几部分（如腓骨长肌、胫骨前肌）。②当神经的入肌点在距离肌肉起点一定距离,且和肌肉的长轴呈一定夹角时,神经将发出两支以上分支,其中一支向肌肉起点方向回返,支配肌肉近端亚部,其余分支向前行,支配远侧肌肉（如股薄肌、缝匠肌）。③当神经入肌点在肌肉的中部,且和肌肉长轴垂直或近乎垂直时,神经将发出两侧分支和前方分支,支配肌肉的三个部分（如足拇展肌、腘肌）[结论]①对临床常用肌瓣及小腿肌肉的大体解剖测定及神经入肌点的测定具有重要的临床意义,能够指导临床避免神经损伤及对肌肉进行亚部移植。②Sihler’s肌内神经染色方法结合大体解剖及显微解剖方法是研究肌内神经分布及走行的理想方法。③骨骼肌可以根据大体解剖及肌内神经染色结果进行综合分类,其中除单羽肌中第一型外均能进行亚部移植。④神经在肌肉内的分布及走行是有规律可循的。
二、组织的HE整块染色改良法（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、组织的HE整块染色改良法（论文提纲范文）
（1）可生物降解的缓释型免疫水凝胶制备及其在三阴性乳腺癌治疗中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 肿瘤免疫治疗简介 |
| 1.2 肿瘤免疫治疗的发展 |
| 1.3 常见肿瘤免疫疗法 |
| 1.3.1 免疫检查点抑制剂 |
| 1.3.2 过继性细胞免疫疗法 |
| 1.3.3 肿瘤特异性疫苗 |
| 1.3.4 TLR激动剂 |
| 1.4 TLR7/8 激动剂R848 在肿瘤免疫治疗中的研究进展 |
| 1.4.1 R848 激活免疫细胞 |
| 1.4.2 R848 重塑肿瘤微环境 |
| 1.5 载体系统在肿瘤免疫治疗中的研究进展 |
| 1.5.1 水凝胶载体 |
| 1.5.2 微球载体 |
| 1.6 本论文的选题依据及研究内容 |
| 2 载R848 聚乳酸-羟基乙酸微球(R848@Ms)的制备及表征 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试剂及仪器 |
| 2.2.1 主要试剂 |
| 2.2.2 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 空白Ms的制备 |
| 2.3.2 R848@Ms的制备 |
| 2.3.3 扫描电子显微镜(SEM) |
| 2.3.4 R848@Ms载药量与包封率的测定 |
| 2.3.5 统计学分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 空白Ms和R848@Ms的制备 |
| 2.4.2 R848@Ms的载药量与包封率 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 载R848@Ms水凝胶(R848@Ms-Gel)的制备及表征 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 试剂及仪器 |
| 3.2.1 主要试剂及材料 |
| 3.2.2 主要仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 水凝胶载体的制备 |
| 3.3.2 水凝胶载体的流变学测试 |
| 3.3.3 扫描电子显微镜(SEM) |
| 3.3.4 水凝胶载体的体外降解 |
| 3.3.5 R848@Ms-Gel的制备 |
| 3.3.6 R848@Ms-Gel的体外释药 |
| 3.3.7 细胞的复苏及培养 |
| 3.3.8 细胞毒性实验 |
| 3.3.9 活死细胞染色实验 |
| 3.3.10 小动物成像 |
| 3.3.11 统计学分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 水凝胶载体的制备及表征 |
| 3.4.2 水凝胶载体的降解测试结果分析 |
| 3.4.3 R848@Ms-Gel的释药结果 |
| 3.4.4 R848@Ms-Gel细胞相容性分析 |
| 3.4.5 小动物成像结果 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 R848@Ms-Gel体内抑癌能力的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 试剂及仪器 |
| 4.2.1 主要试剂及材料 |
| 4.2.2 主要仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 荷瘤小鼠模型的建立 |
| 4.3.2 R848@Ms-Gel体内抑癌实验 |
| 4.3.3 小鼠组织切片HE染色 |
| 4.3.4 小鼠肿瘤组织切片免疫荧光 |
| 4.3.5 ELISA检测小鼠血清中免疫因子和免疫球蛋白 |
| 4.3.6 统计学分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 R848@Ms-Gel的体内抑癌能力分析 |
| 4.4.2 小鼠肿瘤组织切片免疫荧光分析结果 |
| 4.4.3 小鼠血清中免疫因子和免疫球蛋白分析结果 |
| 4.4.4 R848@Ms-Gel的系统毒性评估结果 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 R848@Ms-Gel体内抑制肿瘤转移能力的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 试剂及仪器 |
| 5.2.1 主要试剂及材料 |
| 5.2.2 主要仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 小鼠肺转移模型的建立 |
| 5.3.2 实验小鼠肺部观察 |
| 5.3.3 小鼠肺组织切片HE染色 |
| 5.3.4 小鼠肺组织切片免疫荧光 |
| 5.3.5 统计学分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 实验小鼠肺部观察结果 |
| 5.4.2 小鼠肺组织切片免疫荧光分析结果 |
| 5.5 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 |
| 致谢 |
（2）三维与二维光学成像在胶质母细胞瘤空间异质性研究中的比较与应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 光学组织透明化技术适用于正常脑组织与GBM组织 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 第二章 2D与3D成像方式在脑组织与GBM组织中的比较 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 第三章 3D成像方法为GBM提供了精确的空间异质性信息 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 全文讨论 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词对照表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（3）氯化琥珀胆碱中毒大鼠给药点皮肤处药物含量的UHPLC-HRMS法测定及靶器官损伤的形态学变化（论文提纲范文）
| 英文缩略词(Abbreviation) |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 实验动物 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 急性毒性试验及实验分组 |
| 2.2 制备中毒大鼠 |
| 2.3 样品处理 |
| 2.3.1 血样品处理 |
| 2.3.2 皮肤及肾组织样品处理 |
| 2.4 紫外全波长扫描 |
| 2.5 UHPLC-HRMS 法测定 |
| 2.6 UPLC-MS/MS法测定 |
| 2.7 HE染色 |
| 2.8 Mallory磷钨酸组织化学染色 |
| 2.9 免疫组织化学染色 |
| 2.10 透射电镜超薄切片制备 |
| 2.11 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 急性毒性实验结果 |
| 3.2 SUC的紫外扫描 |
| 3.3 SUC的 UHPLC-HRMS检测方法的建立及大鼠注射点处皮肤中SUC检测 |
| 3.4 UPLC-MS/MS法大鼠肾脏组织中2H-SUC的方法学验证 |
| 3.5 HE 染色结果 |
| 3.6 Mallory磷钨酸组织化学染色 |
| 3.7 免疫组织化学染色 |
| 3.8 透射电镜观察 |
| 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 氯化琥珀胆碱中毒的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）基于基因工程多肽的可注射杂化水凝胶的制备及其在肿瘤治疗中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 可注射水凝胶概述 |
| 1.3 常用的可注射水凝胶材料 |
| 1.4 传统可注射水凝胶面临的问题 |
| 1.5 基因工程多肽以及纳米颗粒杂化的可注射性基因工程多肽水凝胶 |
| 1.6 本论文的主要研究工作和内容安排 |
| 2 可注射性PC10A/PTX/DOX纳米水凝胶用于HeLa肿瘤的协同治疗 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 基于空心纳米金壳和基因工程多肽的可注射杂化水凝胶用于肿瘤的持续化疗和光热治疗 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.3 结果和讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 基于硫化银量子点和基因工程多肽的可注射杂化水凝胶用于第二近红外荧光/光声成像监测肿瘤的化疗和光热治疗 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 基于2D MoS_2纳米片和基因多肽工程的可注射杂化水凝胶用于4T1 肿瘤的化疗/光热治疗/光热动力学/免疫治疗联合治疗 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 全文总结和展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新 |
| 6.3 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录1 攻读学位期间已发表的学术论文 |
| 附录2 博士期间获得的奖励及荣誉称号 |
（5）DHEA对小鼠抵抗大肠杆菌O157:H7感染的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文部分缩写中英文对照 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 肠出血性大肠杆菌研究进展 |
| 1 EHEC O157:H7的起源与进化 |
| 2 EHEC O157:H7病原学 |
| 2.1 形态学与培养特性 |
| 2.2 生化特性 |
| 2.3 抗逆性 |
| 3 EHEC O157:H7流行病学 |
| 3.1 传染源 |
| 3.2 传播途径 |
| 3.3 易感人群 |
| 3.4 全球流行现状 |
| 4 EHEC O157:H7的致病机理 |
| 4.1 志贺毒素 |
| 4.2 LEE致病岛 |
| 4.3 质粒pO157 |
| 5 EHEC O157:H7的防控 |
| 参考文献 |
| 第二章 脱氢表雄酮生物学功能研究进展 |
| 1 脱氢表雄酮的发现 |
| 2 DHEA的合成、代谢与分布 |
| 2.1 肾上腺中DHEA的合成与代谢 |
| 2.2 脑部DHEA的合成与代谢 |
| 3 DHEA的生物学功能研究进展 |
| 3.1 DHEA对营养物质代谢的影响 |
| 3.2 DHEA对机体免疫功能的影响 |
| 3.3 DHEA与抗衰老作用 |
| 3.4 DHEA对神经系统的影响 |
| 3.5 DHEA对心血管系统的影响 |
| 3.6 DHEA对骨质代谢的影响 |
| 参考文献 |
| 第三章 NF-κB与MAPK信号通路及其与炎症的关系 |
| 1 NF-κB信号通路及其与炎症关系研究进展 |
| 1.1 NF-κB信号通路 |
| 1.2 NF-κB信号通路的激活机制 |
| 1.3 NF-κB与免疫的关系 |
| 2 MAPK信号通路研究进展及其与炎症的关系 |
| 2.1 MAPK信号通路概述 |
| 2.2 MAPK通路的调节 |
| 2.3 MAPK与炎症反应的关系 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第一章 DHEA对小鼠抵抗E. coli O157:H7感染的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验菌株 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 E.coli O157:H7致病力测定 |
| 1.5 试验动物分组与处理 |
| 1.6 样品采集 |
| 1.7 小肠的病理组织学观察 |
| 1.8 脾脏指数的测定 |
| 1.9 乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性测定 |
| 1.10 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 E.coli O157:H7感染小鼠半数致死量(LD_(50)) |
| 2.2 DHEA灌胃对小鼠体增重和采食量的影响 |
| 2.3 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠死亡率的影响 |
| 2.4 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠体增重的影响 |
| 2.5 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠腹腔液细菌浓度的影响 |
| 2.6 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠小肠组织病理学变化的影响 |
| 2.7 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠脾脏免疫指数的影响 |
| 2.8 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠脾脏中LDH和ACP活性的影响 |
| 3. 讨论与小结 |
| 3.1 讨论 |
| 3.2 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 DHEA对小鼠抵抗E.coli O157:H7感染作用的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验菌株 |
| 1.2 试验动物及处理 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 脾脏iNOS活性的测定 |
| 1.5 血清NO含量和iNOS活性的测定 |
| 1.6 脾脏中细胞因子mRNA表达分析 |
| 1.6.1 总RNA提取 |
| 1.6.2 反转录 |
| 1.6.3 引物设计合成 |
| 1.6.4 Real-Time PCR |
| 1.7 脾脏和血清中细胞因子含量的测定 |
| 1.8 MAPK和NF-κB通路蛋白表达分析 |
| 1.9 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠脾脏iNOS活性的影响 |
| 2.2 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠血清NO含量和iNOS活性的影响 |
| 2.3 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠脾脏细胞因子表达的影响 |
| 2.4 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠组织中IFN-γ和IL-4含量的影响 |
| 2.5 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠MAPK和NF-κB通路的影响 |
| 3 讨论与小结 |
| 3.1 讨论 |
| 3.2 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 DHEA调节小鼠原代腹腔巨噬细胞抗E.coli O157:H7感染的作用及其机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验菌株 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 小鼠原代腹腔巨噬细胞的分离、培养 |
| 1.5 DHEA对小鼠原代腹腔巨噬细胞相对活力的影响 |
| 1.6 DHEA对E.coli O157:H7感染的小鼠原代腹腔巨噬细胞损伤的影响 |
| 1.7 DHEA对E.coli O157:H7感染的小鼠原代腹腔巨噬细胞噬菌作用的影响 |
| 1.8 小鼠原代腹腔巨噬细胞培养上清中细胞因子含量分析 |
| 1.9 小鼠原代腹腔巨噬细胞iNOS和COX-2蛋白表达分析 |
| 1.10 p38 MAPK和NF-κB通路蛋白表达分析 |
| 1.11 SB203580对小鼠原代腹腔巨噬细胞相对活力的影响 |
| 1.12 SB203580对小鼠原代腹腔巨噬细胞培养上清中细胞因子含量的影响 |
| 1.13 SB203580对小鼠原代腹腔巨噬细胞p38 MAPK和NF-κB通路蛋白表达影响分析 |
| 1.14 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 DHEA对小鼠腹腔巨噬细胞相对活力的影响 |
| 2.2 DHEA对E.coli O157:H7感染小鼠腹腔巨噬细胞损伤的保护效应 |
| 2.3 DHEA对E.coli O157:H7感染的小鼠腹腔巨噬细胞噬菌作用的影响 |
| 2.4 DHEA对E.coli O157:H7感染的腹腔巨噬细胞细胞因子分泌的影响 |
| 2.5 DHEA对iNOS和COX-2表达的影响 |
| 2.6 DHEA对E.coli O157:H7感染腹腔巨噬细胞p38 MAPK和NF-κB通路的影响 |
| 2.7 SB203580对小鼠腹腔巨噬细胞相对活力的影响 |
| 2.8 SB203580对小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子的影响 |
| 2.9 DHEA或SB203580对E.coli O157:H7感染的腹腔巨噬细胞p38 MAPK和NF-κB通路的影响 |
| 3 讨论与小结 |
| 3.1 讨论 |
| 3.2 小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 |
（7）整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 前言 |
| 1. 石蜡组织切片的研究进程 |
| 2. 传统组织切片片染制作法的过程及注意事项 |
| 3. 冰冻切片的发明产生 |
| 4. 整块组织HE染色制作法的研究由来 |
| 第二部分 材料与方法 |
| 1. 实验材料、实验试剂与实验仪器 |
| 1.1 实验材料与实验试剂 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 2. 具体实验方法及步骤 |
| 2.1 自配染液进行整块组织HE染色制片实验 |
| 2.1.1 染色液的配制 |
| 2.1.2 操作步骤 |
| 2.2 创新实验使用HE染色制作脊髓切片取代传统硝酸银染色制片 |
| 2.2.1 配制染液进行整块组织HE染色制片 |
| 2.2.2 制作成片可行性 |
| 3 实验细节方面的改变 |
| 3.1 染色时间的改变 |
| 3.2 注意气温对染色的影响 |
| 3.3 酒精分色时间的调整 |
| 3.4 苏木精染色后蒸馏水浸洗程度的控制 |
| 3.5 实验关键程序的调整 |
| 3.6 对染色效果不理想的弥补 |
| 3.7 简化染色后续制片过程 |
| 第三部分 结果与讨论 |
| 3.1 染色效果分析 |
| 3.1.1 自配染液进行整块组织HE染色制片与传统石蜡组织切片片染制作法切片效果进行对比 |
| 3.1.2 创新实验使用整块组织HE染色制作脊髓与传统硝酸银染色制片效果对比分析 |
| 3.2 具体实验细节方面的改变 |
| 3.2.1 染色时间的调整 |
| 3.2.2 注意温度对染色的影响 |
| 3.2.3 酒精分色时间的调整 |
| 3.2.4 实验程序的调整 |
| 3.2.5 可对染色效果进行调整 |
| 3.3 简化了制作程序 |
| 3.4 整块组织染色注意事项 |
| 3.5 各自适应症的范围 |
| 3.6 两种制片法优缺点比较 |
| 3.6.1 整块组织H.E染色制作切片法相对于传统石蜡组织切片片染制作法的优点 |
| 3.6.2 整块组织H.E染色切片制作法相对于传统石蜡组织切片片染制作法弊端及局限性如下 |
| 3.7 结论 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（8）长白猪肝脏、肾脏和淋巴结的显微形态及糖原PAS反应研究（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 2结果与分析 |
| 3讨论 |
（9）Aβ蛋白PET显像用于AD诊断和疗效监测的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 淀粉样蛋白特异性PET显像剂的合成与鉴定 |
| 正文 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 AD,MCI患者Aβ蛋白PET显像 |
| 正文 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 PET显像评价自然老化AD模型大鼠的实验研究 |
| 正文 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 在读期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（10）临床常用肌瓣及小腿肌肉的神经支配及相关研究（论文提纲范文）
| 中英对照 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 大体解剖学研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 主要试剂及器械 |
| 1.3 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 小腿大体解剖结果 |
| 2.2 临床常用肌瓣的大体解剖结果 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 骨骼肌解剖肌亚部划分背景 |
| 3.2 测量神经入肌点的意义 |
| 3.3 临床常用肌瓣及小腿肌肉的解剖肌亚部划分 |
| 3.4 指导小腿局部皮瓣应用 |
| 第二部分 肌内神经分布的研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 主要溶液的配制 |
| 1.5 Sihler’s 染色法的技术路线 |
| 2. 结果 |
| 2.1 小腿肌肉染色结果 |
| 2.2 临床常用肌瓣的染色结果 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 Sihler’s 肌内神经染色方法的历史 |
| 3.2 小腿肌肉Sihler’s 肌内神经染色结果的意义 |
| 3.3 临床常用肌瓣肌内神经染色的意义 |
| 第三部分 肌肉分类及肌内神经分布规律 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 肌肉分类 |
| 2.1 Ⅰ类扁肌 |
| 2.2 Ⅱ类羽肌 |
| 2.3 Ⅲ类多头肌 |
| 2.4 Ⅳ类扁带肌 |
| 2.5 Ⅴ类多腹肌 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 可行肌亚部移植的肌肉 |
| 3.2 肌内神经分布的规律 |
| 4. 小结 |
| 小结 |
| 致谢 |
| Sihler’s 肌内神经染色法的研究进展 |
| 腹直肌肌皮瓣的应用解剖及其肌内神经分布 |
四、组织的HE整块染色改良法（论文参考文献）
- [1]可生物降解的缓释型免疫水凝胶制备及其在三阴性乳腺癌治疗中的应用[D]. 谢希哲. 大连理工大学, 2021(01)
- [2]三维与二维光学成像在胶质母细胞瘤空间异质性研究中的比较与应用研究[D]. 郭靖琳. 南方医科大学, 2020
- [3]氯化琥珀胆碱中毒大鼠给药点皮肤处药物含量的UHPLC-HRMS法测定及靶器官损伤的形态学变化[D]. 王香溢. 安徽医科大学, 2020(04)
- [4]基于基因工程多肽的可注射杂化水凝胶的制备及其在肿瘤治疗中的应用[D]. 金瑞美. 华中科技大学, 2019(08)
- [5]DHEA对小鼠抵抗大肠杆菌O157:H7感染的影响及其机制研究[D]. 赵金龙. 南京农业大学, 2019(08)
- [6]十二指肠乳头腺瘤内镜下乳头改良切除术的临床研究[J]. 曹俊,李运红,姚玉玲,贺奇彬,吴寒,邹晓平. 中华消化内镜杂志, 2015(11)
- [7]整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究[D]. 蒙兆年. 兰州大学, 2014(10)
- [8]长白猪肝脏、肾脏和淋巴结的显微形态及糖原PAS反应研究[J]. 张家禾,周作红,左伟勇,洪伟鸣,张苏倩,张晖. 安徽农业科学, 2014(06)
- [9]Aβ蛋白PET显像用于AD诊断和疗效监测的实验研究[D]. 郭喆. 中国人民解放军军医进修学院, 2008(08)
- [10]临床常用肌瓣及小腿肌肉的神经支配及相关研究[D]. 于大志. 第二军医大学, 2007(03)