一、关于型的L′Hospital法则的一个改进(论文文献综述)
王楷宬[1](2011)在《猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用》文中认为荚膜是某些细菌在细胞壁外周产生的一种黏液样物质。荚膜多糖对猪链球菌的感染与致病有非常重要的作用,根据荚膜多糖抗原性不同可将猪链球菌分成33个血清型,每个血清型的荚膜多糖都是由糖苷键连接寡糖重复单元而成的结构不同的多糖。荚膜多糖的产生是一个复杂过程,是细菌基因组中多个基因表达的糖基转移酶、乙酰转移酶、多糖合成酶和翻转酶等共同作用的结果,这些基因被称为荚膜多糖合成相关基因簇。研究此基因簇的形式和组成,能够更好地理解猪链球菌荚膜多糖的合成途径、多样性产生原因等;并且可在此基因簇中筛选血清型特异性基因,建立适于大量样品检测的分子生物学定型方法。结合荚膜多糖的组成,也将为揭示某些血清型交叉抗原性产生的原因奠定基础。1.猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇保守区的克隆与分析在分析已知的猪链球菌1、2、7、9型荚膜多糖合成相关基因簇序列,及其各orf与猪链球菌33个血清型基因组DNA杂交结果的基础上,提出猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇具有与肺炎链球菌相似的盒样(cassette-like)结构的假设。并采用PCR、测序和Southern印迹杂交等方法验证这些假设。结果显示,猪链球菌的荚膜多糖合成相关基因簇确存在与肺炎链球菌相似的盒样结构,5’端的前四个调节相关基因同源性极高,基因簇两端都有保守的侧翼基因,且在3’端的侧翼序列中找到了适于扩增荚膜多糖合成相关基因簇中血清型特异性区域的下游引物所在基因(aroA)。同时分析了各血清型的orfY、orfX、cpsA、cpsB、cpsC、cpsD和aroA的进化关系。2.猪链球菌15个血清型荚膜多糖合成相关基因簇的基因分析通过长片段PCR方法扩增猪链球菌14个血清型(1、3、4、5、7、8、9、10、14、16、19、23、25和1/2型)的荚膜多糖合成相关基因簇内的下游基因,鸟枪法测序并拼接成完整的荚膜多糖合成相关基因簇,并与已知的2型此基因簇相比较。这些血清型的荚膜多糖合成相关基因簇可分为2个组的基因型。血清型特异性基因位于基因簇的中间区域,包含糖基转移酶、乙酰转移酶、磷酸转移酶、氨基转移酶、甘油磷酸转移酶、金属蛋白酶,丙酮酰转移酶、多糖转移酶和翻转酶等。这些基因簇的3’端翻译某些IS转座酶。猪链球菌1、2、14、16和1/2型中,有5个蛋白(NeuA,B,C,D和唾液酸转移酶)与唾液酸的合成直接相关。15个基因簇中所有orf翻译蛋白以TribeMCL算法可归为127个同源组。这些血清型荚膜多糖合成相关基因簇的形式,提示猪链球菌的荚膜多糖是通过Wzy依赖途径合成的。同时,比较15个血清型中具有交叉抗原性的细菌的荚膜多糖合成相关基因簇,探讨猪链球菌荚膜多样性产生的机制。3.猪链球菌3、4、5、8、10、16、19、23、25型等9个血清型PCR检测方法的建立及应用除猪链球菌1(14),2(1/2),7和9型外,其余血清型至今无简单快速的PCR检测方法可用,仅能使用耗时费工的血清凝集方法进行定型。随着人和动物感染猪链球菌的血清型越来越复杂,迫切需要建立快速敏感的检测方法来解决临床诊断中的诸多问题。本文基于交叉杂交试验的结果,筛选9个血清型(3、4、5、8、10、16、19、23、25)的血清型特异性基因,并在此基础上建立了这些血清型的PCR检测方法,对199株各血清型的猪链球菌临床分离株进行检测,同时利用血清凝集方法进行定型。这些PCR方法的检测结果与经典的血清凝集方法一致,不仅能检测参考菌株,而且能检测临床分离株,并可直接应用菌液作为模板进行检测,血清学不能鉴别的菌株鉴定中也有一定作用,对猪链球菌的检测、鉴定有重要意义。4.猪链球菌1、2、14、1/2型荚膜多糖的单糖组成比较研究猪链球菌1、2、14和1/2型间存在单向或双向的交叉抗原性,这种交叉抗原性的产生原因至今未被揭示。采用Sephacryl S-300凝胶层析柱对猪链球菌14和1/2型荚膜多糖进行分离纯化,经苯酚-硫酸检测和dot-ELISA辅助鉴定,确定荚膜多糖成分。采用高效凝胶渗透色谱法测定14和1/2型猪链球菌荚膜多糖分子量分别为487.38 kD和512.72 kD。经柱前衍生高效液相色谱法、荧光标记液相色谱法和核磁共振测定14和1/2型猪链球菌荚膜多糖单糖组成分别为:Glc/Gal/GlcNAc/Rha/Neu5Ac (1:2.94:1.35:0.24:0.37)和Glc/Gal/GlcNAc/GalNAc /Rha/Neu5Ac (1:1.67:1.05:0.93:0.72:0.7).并与已知的猪链球菌1、2型荚膜多糖的单糖组成进行比较分析,发现4种血清型荚膜多糖都具有Glc. GlcNAc.Gal和Neu5Ac,但单糖组成和比列并无明显相似性,这种交叉抗原性可能是由于荚膜多糖的空间结构相似性和(或)细胞表面的其他成分引起的。
姚云飞[2](2001)在《关于型的L′Hospital法则的一个改进》文中认为本文对现行的数学分析、微积分及其高等数学的教材中的 ∞∞ 型的 L′Hospital法则进行了一个改进 ,论证了该法则在无须考虑分子是否趋于∞的条件时 ,仍旧成立 ,利用了这个减弱了的 ∞∞ 型的 L′Hospital法则给出了一大类的极限问题的简单解法
姚云飞[3](1997)在《关于∞/∞型的L′Hospital法则的一个改进》文中指出本文对现行的数学分析、微积分及其高等数学的教材中的∞/∞型的L′Hospital法则进行了一个改进,论证了该法则在无须考虑分子是否趋于∞的条件时,仍旧成立,利用了这个减弱了∞/∞型L′Hospital法则给出了一大类的极限问题的简单解法。
二、关于型的L′Hospital法则的一个改进(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、关于型的L′Hospital法则的一个改进(论文提纲范文)
(1)猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一篇 文献综述 |
第一章 细菌荚膜多糖 |
1 化学结构 |
2 合成相关基因 |
2.1 革兰氏阴性菌荚膜产生相关基因 |
2.2 革兰氏阳性菌荚膜产生相关基因 |
3 荚膜多样性产生的机制 |
4 生物合成 |
5 功能 |
5.1 耐干燥 |
5.2 黏附 |
5.3 抵抗宿主的非特异性免疫 |
5.4 抵抗宿主特异性免疫 |
5.5 细菌与植物之间的相互作用 |
6 应用 |
6.1 疫苗 |
6.2 治疗癌症 |
参考文献 |
第二章 猪链球菌流行情况 |
1 猪链球菌及猪链球菌病 |
2 流行病学特点 |
2.1 感染猪的流行特征 |
2.2 感染人的流行特征 |
3 猪链球菌在中国的流行情况 |
4 其它国家的流行情况 |
4.1 美洲 |
4.2 欧洲 |
4.3 亚洲 |
4.4 大洋洲 |
参考文献 |
第二篇 试验研究 |
第三章 猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇保守区的克隆与分析 |
摘要 |
1 材料和方法 |
1.1 细菌与培养 |
1.2 模板DNA的提取 |
1.3 CPS locus的5’端保守基因及侧翼序列的克隆测序 |
1.4 CPS locus的3’端保守侧翼序列的筛选 |
1.5 CPS locus的3’端保守侧翼序列的测序 |
1.6 序列分析 |
2 结果 |
2.1 CPS locus的5’端保守基因及侧翼序列 |
2.2 CPS locus的3’端保守侧翼序列的筛选与测序 |
2.3 进化树分析 |
3 讨论 |
参考文献 |
ABSTRACT |
第四章 猪链球菌15个血清型荚膜多糖合成相关基因簇的基因分析 |
摘要 |
1 材料与方法 |
1.1 细菌与培养 |
1.2 模板DNA的提取 |
1.3 猪链球菌部分血清型CPS locus下游片段的扩增 |
1.4 鸟枪法(shotgun)测序 |
1.5 猪链球菌部分血清型完整CPS locus的拼接 |
1.6 orf和转录单位分析 |
1.7 orf翻译蛋白的同源组分析与BPGN命名 |
1.8 序列比较与进化分析 |
2 结果 |
2.1 猪链球菌1、3、4、5、7、8、9、10、14、16、19、23、25、1/2型CPS locus的序列 |
2.2 HGs分析 |
2.3 起始转移酶、合成酶和翻转酶 |
2.4 猪链球菌1、2、14、16和1/2型的唾液酸合成 |
2.5 糖基转移酶 |
2.6 其他转移酶 |
2.7 猪链球菌1、2、14和1/2型CPS locus的比较 |
3 讨论 |
参考文献 |
ABSTRACT |
第五章 猪链球菌3、4、5、8、10、16、19、23、25型等9个血清型PCR检测方法的建立及应用 |
1 材料和方法 |
1.1 菌株与培养 |
1.2 探针的制备 |
1.3 特异性基因的筛选 |
1.4 PCR检测方法建立与应用 |
1.5 血清凝集鉴定分离株的血清型 |
2 结果 |
2.1 型特异性基因 |
2.2 PCR方法的建立与应用 |
3 讨论 |
参考文献 |
第六章 猪链球菌1、2、14、1/2型荚膜多糖的单糖组成比较研究 |
1 材料与方法 |
1.1 荚膜多糖的提取 |
1.2 荚膜多糖的纯化 |
1.3 荚膜多糖鉴定 |
1.4 荚膜多糖的分子量测定与分析 |
1.5 荚膜粗多糖的柱前衍生液相色谱法分析 |
1.6 荧光标记液相色谱法测定唾液酸含量 |
1.7 唾液酸与其他单糖比例的测定 |
2 结果 |
2.1 荚膜多糖的分离与纯化 |
2.2 荚膜多糖的鉴定与分析 |
2.3 荚膜多糖的分子量 |
2.4 荚膜多糖的柱前衍生液相色谱法分析 |
2.5 唾液酸种类及与其他单糖比例的测定结果 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文总结 |
附录1:猪链球菌各血清型cps基因各ORF的功能及其与其它细菌蛋白的相似性 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
四、关于型的L′Hospital法则的一个改进(论文参考文献)
- [1]猪链球菌荚膜多糖合成相关基因簇的分析及其在血清型鉴定中的应用[D]. 王楷宬. 南京农业大学, 2011(05)
- [2]关于型的L′Hospital法则的一个改进[J]. 姚云飞. 工科数学, 2001(06)
- [3]关于∞/∞型的L′Hospital法则的一个改进[J]. 姚云飞. 阜阳师范学院学报(自然科学版), 1997(01)